牛膝多糖对免疫应激仔猪肠道的影响及其作用机理

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本试验用大肠杆菌脂多糖(LPS)一次刺激仔猪建立应激模型,研究牛膝多糖(ABPS)对仔猪肠道结构与功能的影响,探讨ABPS能否缓解LPS应激仔猪的肠道损伤及作用机理。选用40头健康断奶仔猪(28±1日龄,7.25±0.23kg),随机分为4个处理(正常对照组、LPS对照组和2个试验组),每个处理10个重复,每个重复1头猪。分别饲喂以下日粮,为期24天。预饲6天,正式期18天。具体分组方案如下:正式试验第1-15d,不进行LPS刺激,空白组Ⅰ和Ⅱ组饲喂基础日粮,Ⅲ组、Ⅳ组饲喂基础日粮+0.10%牛膝多糖;正式试验第16d后,对照组Ⅲ和试验组Ⅳ仔猪分别腹膜注射80μg/mL·BW脂多糖(LPS),对照Ⅰ、Ⅱ组注射相应剂量的灭菌生理盐水,所饲喂的日粮与前期(1-16d)一致。在正式试验第16dLPS注射2h后,按1mL/kg’BW对所有仔猪口腔灌服10%D-木糖溶液,分别于LPS注射后3h和24h对猪进行前腔静脉采血和屠宰取样。试验检测指标与结果如下:牛膝多糖对脂多糖刺激仔猪肠粘膜免疫屏障的影响通过测试注射LPS3h和24h血液和肠黏膜抗氧化能力,肠黏膜一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性,黏膜SIgA含量,研究ABPS对回肠黏膜抗氧化能力的影响,血浆D-木糖浓度,血浆内毒素含量,肠黏膜DAO活性来研究ABPS对仔猪回肠结构和功能的影响。结果显示,仔猪腹膜注射LPS3h后,导致仔猪回肠黏膜MDA含量极显著升高(p<0.01)和SOD活性显著下降(p<0.05),添加0.1%ABPS的日粮在一定程度上提高回肠黏膜SOD活性,极显著降低MDA含量(p<0.01),显著提高MPO活性(p<0.05),缓解LPS刺激导致的仔猪肠黏膜抗氧化能力降低;LPS刺激导致仔猪血浆D-木糖浓度下降,0.10%牛膝多糖组的血浆D-木糖含量提高,差异极其显著(p<0.01),表明牛膝多糖可以改善LPS应激对肠道吸收功能的影响;LPS应激可以使血浆内毒素含量迅速上升(p<0.01),而添加0.1%ABPS的日粮可以极显著降低血浆中内毒素含量(p<0.01);LPS应激可以使血浆DAO活性上升(p>0.05);LPS刺激导致回肠黏膜NO浓度显著提高(p<0.05);仔猪腹膜注射LPS24h后,仔猪回肠黏膜MDA含量没有显著变化和SOD活性无显著变化(p>0.05),添加0.1%ABPS的日粮在一定程度上提高回肠黏膜SOD活性,极显著降低MDA含量(p<0.01),显著提高MPO活性(p<0.05),缓解LPS刺激导致的仔猪肠黏膜抗氧化能力降低;LPS刺激导致回肠黏膜NO浓度显著提高(p<0.05);因此,ABPS通过影响肠黏膜抗氧化能力和NO/NOS体系发挥其对缓解LPS应激造成的肠黏膜屏障受损。(2) ABPS对脂多糖刺激仔猪肠道黏膜结构和形态的影响通过测试肠黏膜DNA/RNA和蛋白质含量、绒毛长度、隐窝深度、绒毛长度/隐窝深度,淋巴细胞凋亡及杯状细胞数,研究ABPS对LPS应激下回肠粘膜肠道形态的影响。结果显示,LPS刺激导致RNA/DNA显著下降(p<0.05),绒毛长度、隐窝深度、绒毛长度和隐窝深度比显著下降(p<0.05),ABPS对DNA/RNA没有显著影响(p>0.05),对绒毛长度、隐窝深度、绒毛长度和隐窝深度比都有显著提高(p<0.05);LPS刺激导致仔猪肠道黏膜上皮间杯状细胞数量极显著下降,而0.1%牛膝多糖组极显著提高仔猪肠道黏膜上皮间杯状细胞数,表明牛膝多糖可以改善LPS应激对肠道杯状细胞数量下降的影响;LPS刺激导致仔猪肠道黏膜上皮间淋巴细胞凋亡数量极显著升高(p<0.01),而添加了0.10%牛膝多糖使断奶仔猪肠道黏膜淋巴细胞凋亡数量极其显著的降低(p<0.01),表明牛膝多糖可以改善LPS应激对肠道淋巴细胞凋亡数量增多的影响。
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