苘麻抑菌成分提取及其抑菌作用研究

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植物是大自然中生物活性物质富集的宝库,其中抑菌活性物质在植物中分布广泛。人们在植物中研究得出有抗菌生物活性的有效成分种类很多,主要有黄酮类、皂苷类、有机酸、甾类、挥发油类、蒽醌类、萜类、生物碱类等。茼麻(Abutilon thpeohrasti Medic.)是属于锦葵科植物,全球有150多种,治疗淋病、风湿、泄泻等疾病。苘麻在民间应用广泛,为了充分开发利用这一丰富植物资源,国内外对其在生态机理等方面的研究报告很多,而对它在抗菌成分、抗菌机理方面却鲜有报道。本文对其非挥发性成分和挥发性成分进行了提取、筛选并对其活性成分进行了体外抑菌等药效基础研究。本文对苘麻茎叶中非挥发性成分和挥发油分别进行了提取,并对提取物的抗菌活性进行了初步评价。对挥发油中的主要成分采用GC-MS进行了鉴定;对具有抑菌活性的非挥发成分采用柱层析进行了分离,并鉴定了部分物质的结构。(1)通过微波辅助同时蒸馏萃取装置提取苘麻茎叶中的挥发油,并采用响应面法对提取工艺进行优化,获得最佳提取工艺条件为:料液比1:12,微波功率385W,提取时间为10min。在此条件下,挥发油的提取率为:0.183%。(2)对苘麻中提取得到的挥发油进行GC-MS分析,结果表明,苘麻挥发油中主要是植物醇、酯类、酮类及游离羧酸类、酚类成分,其中3种成分含量最高,分别为植物醇Phytol):(E)-3,7,11,15-四甲基-2-十六碳烯-1-醇;丙酸,2-甲基-3-羟基-2,4,4-三甲基戊基酯(Propanoicacid,2-methyl-,3-hydroxy-2,4,4-trimethylpentyl ester)和 9,12,15-十八碳三烯酸即(Z,Z,Z)-9,12,15-Octadecatrienoic acid,含量分别为 29.20%,12.81%,11.22%。(3)对苘麻茎叶提取物依次用正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯进行萃取,以萃取部分对枯草芽孢杆菌的抑制效果(抑菌圈直径)为评价指标分析其菌活性。结果显示抑菌效果最强的极性段为二氯甲烷部分,其对枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径为12.17 mm。(4)采用硅胶柱层析和制备液相对二氯甲烷萃取部分进行分离,通过抑菌活性测定从中分离出3种有较强抑菌作用的成分,经鉴定它们为3种内酯类成分:莨菪亭、咖啡酸甲酯和阿魏酸甲酯。(5)以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、农杆菌为供试菌,采用琼脂扩散法法研究了二氯甲烷萃取部分、挥发油以及3种内酯类成分(咖啡酸甲酯、莨菪亭、阿魏酸甲酯)的抗菌活性。实验表明,上述5种材料对均有较强抑菌作用,其抑菌强度依次为:阿魏酸甲酯>莨菪亭>咖啡酸甲酯>二氯甲烷萃取部分>挥发油。咖啡酸甲酯、阿魏酸甲酯、莨菪亭。测定了3种内酯成分对3种菌(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌及农杆菌)抑制作用,结果表明:苘麻中内酯类化合物、阿魏酸甲酯、莨菪亭对供试菌大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、农杆菌的最小抑菌浓度MIC值分别是咖啡酸甲酯(1.563 mg/mL、3.125 mg/mL、0.391 mg/mL)、阿魏酸甲酯(0.781 mg/mL、0.781 mg/mL、0.195 mg/mL)、莨菪亭(1.563 mg/mL、0.781 mg/mL、0.195 mg/mL)。
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