【摘 要】
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HE4(human epididymis gene product 4,又名WFDC2,WAP four-disulfide core protein2)基因在卵巢癌组织中高表达,但是在正常组织包括卵巢组织中不表达或低表达.因此该基因可
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HE4(human epididymis gene product 4,又名WFDC2,WAP four-disulfide core protein2)基因在卵巢癌组织中高表达,但是在正常组织包括卵巢组织中不表达或低表达.因此该基因可能是一个卵巢癌相关基因,该基因的启动子可能是一个卵巢癌特异性的启动子.筛选肿瘤特异性的启动子是肿瘤基因治疗中解决治疗基因靶向性表达问题的关键.在HE4基因的转录调控研究过程中,我们发现:1,HE4基因的表达并不是卵巢癌特异性的,除了在卵巢癌细胞株SKOV3中高表达外,在子宫颈癌细胞株C33A,肝癌细胞株HepG2以及人胚肾细胞株293中也存在高表达.而在另一些细胞株如肺癌细胞株A549,SPC-A1及肝癌细胞株SMMC-7721,BEL7402中则低表达或不表达.2,引物延伸法确定了HE4基因的转录起始点位于翻译起始点(ATG)上游-27位.3,对HE4基因启动子的系统缺失分析发现从转录起始点上游-107bp到下游+29bp是该基因的最小启动子的区域.该区域富含GC以及缺少传统的TATAbox和CCAAT box.4,连接体扫描突变及电泳迁移率改变实验揭示了位于HE4启动子(-71,-48)位的2个Sp1结合位点是该启动子发挥作用的必需元件.5,甲基化特异性PCR结合测序反应结果发现在HE4基因低表达细胞株SMMC-7721中HE4基因启动子存在被甲基化现象,但是体外甲基化实验提示DNA的甲基化可能没有参与HE4基因的转录调控.6,共转染实验显示外源性的转录因子Sp1和NF-κ B能显著抑制HE4基因启动子的活性,但具体作用机制有待进一步研究.
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