炎症是由外来条件引起的,从而发生损伤并抗损伤的双重应激过程,强烈或接连的炎性反应会对组织引发损伤,也可能导致许多疾病,如糖尿病、心血管疾病、肿瘤等,线粒体在细胞能量代谢中起着重要的作用,TCA循环通路是线粒体产能的关键通路。因此炎症与TCA循环的关联性研究拥有非常的含义。目的:探讨炎症和抗炎环境对线粒体中TCA循环关键酶表达的影响,并分析TCA循环与线粒体功能的相关性,为今后相关疾病的治疗提供理论依据。方法:用质量浓度为1μg/m L的LPS刺激RAW264.7巨噬细胞,待诱导出炎症后,再用浓度为5 mmo L/L的Met对巨噬细胞进行抗炎操作,使用q RT-PCR技术和Western Blot技术检测造模后的巨噬细胞线粒体中TCA循环通路中的关键酶OGDH、CS、IDH2、MDH2的变化情况,使用Western Blot技术测定机体自噬关联蛋白LC3b在药物刺激下的变化情况,使用流式细胞仪检验线粒体膜电位和ROS的变化,以此推断线粒体功能的变化。使用6只8周龄雄性C57BL/6J小鼠,经腹腔注射LPS和二甲双胍,取肺组织做HE染色证实模型的有效性,运用Western Blot实验手段验证小鼠肺组织中线粒体TCA循环通路中的关键酶OGDH、CS、IDH2、MDH2的变化情况和机体自噬关联蛋白LC3b的表达情况。结果:基于体外细胞实验,经q RT-PCR技术测定TCA循环通路中的关键酶CS、IDH2、MDH2、OGDH在LPS刺激下m RNA的表达水平均降低,经Western Blot技术测定TCA循环中的关键酶CS、OGDH和IDH2蛋白表达量下降;而使用二甲双胍抗炎后,经q RT-PCR技术测定TCA循环通路中的关键酶CS、IDH2、MDH2、OGDH的m RNA的表达水平均有所回升,经Western Blot技术测定CS、OGDH和IDH2的蛋白表达量也有所回升。小鼠模型实验结果显示,注射LPS后,TCA循环中的关键酶OGDH、CS、MDH2蛋白表达量降低;使用二甲双胍抗炎后OGDH和MDH2的蛋白表达量有所回升。即在LPS刺激下,线粒体TCA循环总体上效率减弱,抗炎后其效率有所恢复。通过使用体外细胞实验,运用流式细胞手段测定,使用LPS刺激后ROS增高,膜电位降低,经Western Blot技术测定机体自噬关联蛋白LC3b在细胞模型同小鼠模型中都增高;在二甲双胍抗炎后,细胞模型中线粒体ROS降低,线粒体膜电位降低,细胞自噬相关蛋白LC3b在细胞模型和小鼠模型中都降低。即LPS刺激下线粒体功能紊乱,抗炎后其功能有所恢复。结论:脂多糖诱导的巨噬细胞炎症环境降低了四种酶的表达,线粒体功能受到影响。动物实验结果与细胞实验结果一致。线粒体功能与TCA循环的稳定性密切相关。