自1983年首例转基因作物问世以来,在给人类带来巨大福音的同时也带来了潜在的风险,转基因作物安全问题也逐渐被人们重视。各国政府纷纷制定相关政策法规,要求对转基因作物及其产品实施标识管理制度。这些法规实施的前提就是要建立一套稳定、准确的转基因检测技术。本研究以转基因玉米MON810为材料,在构建标准质粒的基础上,建立了对MON810定性PCR和荧光定量PCR检测方法,主要研究结果如下:1、为了获得高质量的基因组DNA,本研究比较了多种提取玉米叶片组织和玉米种子基因组DNA的方法,并对其进行了优化,得到了玉米叶片组织和种子基因组DNA的最佳提取方法,进而为在核酸方面检测转基因作物提供了依据。2、分别通过Tail-PCR和I-PCR的方法获得了MON810的左边界序列,比较了两种方法的难易程度,Tail-PCR实验过程简单但结果分析繁琐;I-PCR实验过程繁琐但结果分析简单,从本文的实验情况来看,选择I-PCR为获得边界序列的主要方法。3、通过重叠延伸PCR的方法将MON810的左边界序列mt及外源基因CaMV35S启动子、hsp70、cry1Ab连接成一个大片段,经过纯化,再将其连接到pMD18-T载体,最后通过双酶切的方法将玉米内标基因SSⅡb连入同一载体,构成适于MON810检测的标准质粒pMD-MON810。4、根据MON810转入的外源基因,设计了针对CaMV35S、hsp70和cry1Ab的引物,并且设计了针对左边界序列和内标基因的引物,从而建立了MON810品系的定性检测系统。5、建立了基于染料SYBR GreenⅠ荧光PCR的定量检测体系,利用标准质粒建立的线性回归方程,计算出未知样品的转基因含量。定量体系的检测灵敏度达到50个拷贝,可以完全满足国际上对转基因定量检测的需要。