【摘 要】
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研究表明,人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是导致宫颈癌的关键致病因素,如今上市的三种HPV预防性疫苗在全世界已得到广泛使用,但预防性疫苗对于HPV阳性群体无法起到治疗和清除作用,而在宫颈癌患者中,常用的传统方法放疗化疗手术切除等,对于晚期或宫颈癌复发患者作用甚微,开发一种新型免疫治疗策略成为未来治疗宫颈癌的新思路。T细胞表位肽由8-11个氨基酸组成,特定表位免疫能够
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研究表明,人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是导致宫颈癌的关键致病因素,如今上市的三种HPV预防性疫苗在全世界已得到广泛使用,但预防性疫苗对于HPV阳性群体无法起到治疗和清除作用,而在宫颈癌患者中,常用的传统方法放疗化疗手术切除等,对于晚期或宫颈癌复发患者作用甚微,开发一种新型免疫治疗策略成为未来治疗宫颈癌的新思路。T细胞表位肽由8-11个氨基酸组成,特定表位免疫能够精确靶向并诱导细胞毒性反应,杀伤肿瘤细胞。且合成多肽相比于完整蛋白在安全性和大批量生产方面具有很大优势。本论文以HPV16病毒E7蛋白的T细胞表位多肽作为抗原,以纳米技术与免疫学相结合,通过化学合成HPV16 E786-93多肽,与Cp G佐剂通过自身带电荷不同相互作用自组装形成纳米颗粒。随后测定纳米颗粒的粒径、及包载率等。证明多肽与Cp G可以自组装成球形结构且稳定性较高。随后通过体外培养DC,测定纳米复合物刺激后的细胞培养上清中细胞因子浓度,结果显示纳米颗粒在激活骨髓来源树突状细胞(Bone Marrow-Derived Dendritic Cells,BMDC)成熟及细胞因子分泌方面纳米颗粒均表现出有别于非纳米形式给药的显著增加。最后观察纳米疫苗在接种TC-1细胞的小鼠体内的抗肿瘤效应,平均肿瘤体积仅为对照组的18%。通过流式测定外周血、脾脏、瘤内浸润性T细胞比例,均显示出纳米疫苗可显著刺激瘤内、脾脏及外周血中T淋巴细胞增加,说明HPV16 E786-93多肽联合Cp G自组装纳米颗粒疫苗能有效且稳定抑制TC-1移植小鼠的肿瘤体积,并改善肿瘤微环境。通过本课题研究,将为未来临床研究提供有价值的抗原递送策略,并为进一步探究治疗性HPV疫苗奠定理论基础。
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