高产色素红曲菌菌株的选育及深层发酵之研究

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对实验室的红曲色素产生菌进行了筛选,获得了一株色素产量较高的紫色红曲菌M5(Monascus purpureus M5)作为诱变育种的出发菌株,其液态摇瓶发酵的红、黄色素的色价分别为154.5u/mL和143u/mL。采用低能离子注入诱变,诱变的能量为10kev,剂量为1.56×1015 ions/cm2时,致死率为71.2%。经筛选分离,获得红曲菌突变株M532,其液态摇瓶发酵的红、黄色素色价分别达298.6u/mL和268.5u/mL,较出发菌株分别提高了93.3%和87.8%,经传代稳定性试验证明其遗传稳定性良好。其固态发酵的红曲米红、黄色素色价分别达6025.5u/g和5650u/g,与出发菌株M5的2630u/g和2180u/g相比,分别提高了137.6%和159.1%,色调也由0.83提高到0.94。M532的生理特性实验表明其适宜的生长温度范围为30℃-40℃,pH为4.0—5.5。   通过对培养基成分及接种龄、接种量等初始培养条件对红曲菌M532产色素的影响的研究,得到M532产色素合适的培养条件为:大米粉70 g/L,可溶性淀粉30 g/L,黄豆粉10 g/L,NaNO30.5 g/L,接种龄39 h,接种量8%-10%,温度35℃,初始pH4.0,摇瓶发酵144 h其红色素达到322.8u/mL,黄色素达到296.3u/mL。在5L发酵罐中进行M532的液态分批发酵实验,当搅拌转速为500r/min,通气量为0.6vvm时,M532发酵90h红色素色价达257.6u/mL,黄色素达237.0 u/mL。经补料分批发酵实验,发现在72h和96h各补加浓度为0.1g/L的葡萄糖300mL,发酵114 h红、黄色素的色价分别达到343.2u/ml和307.6u/ml,相比分批发酵提高了33.5%和29.8%。
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