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目的探讨HBV C1653T点突变、1762T/G1764A双位点突变与肝细胞癌发生的关系。方法1、收集2009年1月—2010年5月在宁夏回族自治区五家医院住院的88例HBV相关肝细胞癌(HCC)患者和104例慢性乙肝(CHB)患者血清和一般病例资料。采用巢式PCR扩增目的基因片段(nt1606-2606)并直接测序,测序结果用ChromaS软件与Genbank上登记的标准序列比较,分析慢性乙肝组和肝细胞癌组HBV C1653T位点、A1762T/G1764A双位点突变情况;HBV标志物和HBV DNA定量分别采用酶联免疫法吸附法(ELISA)和PCR荧光探针法(PCR-FQ)检测。2、分析HBV C1653T点突变、1762T/G1764A双突变与HBV DNA和e抗原的关系。3、采用多因素LogistiC回归分析年龄、e抗原、伴有肝硬化、HBV DNA、HBV C1653T点突变、1762T/G1764A双位点突与肝细胞癌的发生是否相关,P<0.05为差异有统计学意义。结果1、C1653T点突变率在肝细胞癌组和慢性乙肝组中分别为35.25%(31/88)和12.5%(13/104),肝细胞癌组明显高于慢性乙肝组(P=0.00)。2、A1762T/G1764A双位点突变率在肝细胞癌组和慢性乙肝组中分别为67.05%(59/88)和49.04%(51/104),肝细胞癌组明显高于慢性乙肝组(P=0.00)。3、C1653T点突变患者组与无突变患者组HBV DNA定量值比较没有统计学差异性(5.446±1.075copies/mL Vs 5.821±1.163copies/mL,P=0.068);A1762T/G1764A双突变患者HBV DNA定量值明显高于无突变患者,差异有统计学意义(6.135±1.186 copies/mL Vs 5.034±1.432 copies/mL,P=0.00 )。4、HBeAg阴性组中C1653T位点的突变率明显高于HBeAg阳性组(32.71% Vs 10.59%,P=0.00);HBeAg阴性组A1762T/G1764A双位点突变率明显高于HBeAg阳性组(69.16% Vs 42.46%,P=0.00)。5、多因素LogistiC回归分析提示C1653T点突变、A1762T/G1764A双突变是肝细胞癌发生的危险因素(P=0.001,OR=4.686;P=0.007,OR=2.848)。结论1、HCC组HBV C1653T位点突变率显著高于CHB组,多因素logistic回归分析该位点突变是肝癌发生的危险因素,这一结果或许可作为HBV感染者临床结局的可预测性分子标记。2、HCC组HBV A1762T/G1764A双位点突变率显著高于CHB组,多因素logistic回归分析BCP区双位点突变是肝细胞癌发生的危险因素,该结果或许可作为HBV感染者发展为肝癌的早期预警信号3、HBV C1653T位点突变对HBV的复制可能没有影响;HBV A1762T/G1764A双突变可能提高了HBV的复制能力。4、HBV C1653T位点突变、A1762T/G1764A双位点突变可能抑制HBeAg的表达。