灵芝多糖的提取分离、结构表征及抗氧化活性研究

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灵芝(Ganoderma lucidum)是一种著名的食药兼用真菌。古医书记载灵芝乃药中之王,具有补气安神,止咳平喘的功效。研究表明,灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)是其最主要的活性成分之一,具有提高机体免疫力、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、助眠等功能,开发价值极大。随着灵芝代料栽培技术的发展,灵芝产量有很大提高,山东冠县是全国主要的灵芝栽培基地,灵芝产量年达7000吨,约占全国灵芝市场的一半以上。但冠县灵芝长期存在量多价低的现象。本研究选取冠县木糖醇渣栽培灵芝作为研究对象,主要研究了冠县灵芝多糖的提取分离、结构表征和抗氧化活性,旨在为合理开发冠县灵芝资源提供理论依据,提高冠县灵芝产品附加值。主要研究内容和结果如下:1.热水浸提法的工艺参数为:液料比40:1 m L/g,提取时间3 h,醇沉时间8 h,灵芝多糖GLP-W的提取得率为0.63%。采用低共熔溶剂法进行响应面优化,GLP-(Ch Cl-Urea)提取工艺为氯化胆碱-尿素含量34%,提取时间1.9 h,醇沉时间7.3 h,提取得率为1.10%;GLP-(Ch Cl-Oxa)的提取工艺为氯化胆碱-草酸含量46%,提取温度79.7℃,醇沉时间12.7 h,提取得率为1.02%。2.比较了热风干燥、直接冷冻干燥和复溶冷冻干燥三种干燥方式对多糖的理化性质与抗氧化活性分析得知复溶冷冻干燥最适合灵芝多糖。3.对热水浸提法灵芝多糖进行乙醇分级以获得活性最高的多糖组分,GLP80是初步分级多糖含量最高且活性最好的灵芝多糖,再分级中GLP80D含量最高、GLP80A抗氧化活性最好。4.对灵芝多糖进行测定可知本实验所获灵芝多糖均含有少量核酸类物质,具有典型的多糖特征吸收峰,均为β-型吡喃糖,且均以葡萄糖为主。5.抗氧化结果表明不同提取方法的多糖的清除DPPH自由基的活性强弱排序分别为GLP-(Ch Cl-Oxa)>GLP-W>GLP-(Ch Cl-Urea),清除羟自由基的排序分别为GLP-W>GLP-(Ch Cl-Oxa)>GLP-(Ch Cl-Urea),还原力排序为GLP-(Ch Cl-Oxa)>GLP-(Ch Cl-Urea)>GLP-W;综合比较可知,低共熔溶剂法提取的灵芝多糖不仅得率高,还具有较强的抗氧化活性,为今后提取和开发天然活性成分提供了科学依据。
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