藏药鲁堆多吉水提物对雄性大鼠生殖系统的影响及作用机制的研究

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目的:人类繁衍生息的基础是生殖,生殖健康是人类健康的核心。近年来,男性生殖系统发病率逐年升高,男性生殖健康问题备受关注,是现在医学科学研究的重点。藏医药有数千年的悠久历史,它是藏族劳动人民同疾病作斗争积累起来的经验和理论总结,从藏药中寻找天然、安全,并且能调节生殖功能的药物对人类的生殖健康有重要意义。本课题以藏药鲁堆多吉(藏党参)——长花党参(Codonopsis thalictrifolia Wall. Var.mollis(Chipp)L.T.Shen)为研究对象,观测藏党参水提物对雄性幼龄大鼠和成龄大鼠生殖系统的作用,用血清药理学方法研究藏党参水提物对睾丸间质细胞睾酮分泌功能的影响及其机制途径。为开发藏党参提供科学的实验数据。方法:用藏党参水提物和潞党参水提物灌胃幼龄大鼠和成龄大鼠,两周后,测量大鼠体重,精子密度,睾丸、附睾、精囊重量的变化;用放射免疫法检测大鼠血清睾酮(T)的变化,用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠血清双氢睾酮(DHT)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的变化。用高效液相色谱法分析对照组、藏党参给药组和潞党参给药组大鼠血清之间的化学成分的差异,以及藏党参水提物和潞党参水提物之间化学成分的差异。建立大鼠睾丸间质细胞的体外培养技术,然后用血清药理学的力法研究藏党参含药血清和潞党参含药血清对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌功能的影响,并对其作用机制进行初步探究。结果:灌胃大鼠两周后,藏党参水提物和潞党参水提物的低剂量组(10g/Kg)、中剂量组(20g/Kg)和高剂量组(40g/Kg)能剂量依赖性地降低幼龄大鼠的睾丸重量、精子密度、血清睾酮(T)含量(P<0.05);低剂量组能显著降低幼龄大鼠血清双氢睾酮(DHT)含量(p<0.05);高剂量组能显著降低幼龄大鼠的体重增加量(p<0.01);同时幼龄大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)浓度呈剂量依赖性显著升高(p<0.05)。灌胃大鼠两周后,藏党参水提物和潞党参水提物的低剂量组(10g/Kg)、中剂量组(20g/Kg)和高剂量组(40g/Kg)能剂量依赖性地降低成龄大鼠的体重增长量、睾丸重量、附睾重量、精囊重量、精子密度、血清睾酮(T)和双氢睾酮(DHT)含量(P<0.05);同时成龄大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)浓度呈剂量依赖性升高。与对照组血清的高效液相色谱图对比发现,藏党参和潞党参龠药血清均在280nm下约20min时出现一个显著的小尖峰,这说明给药组大鼠血清中含有药效物质。藏党参和潞党参水提液与含药血清高效液相色谱图相比在280nm下约20min时没有出现一个显著的小尖峰,提示血清药效物质为藏党参和潞党参水提液中的代谢成分。睾丸间质细胞的培养实验中,通过台盼蓝排斥实验和睾酮的基础分泌都证明了本实验离体大鼠的睾丸间质细胞的功能良好,结果显示离体培养24h细胞活率仍高达95%。随着含药血清添加量的增加,睾丸间质细胞睾酮的分泌能力逐渐降低。与空白对照组相比较,加入藏党参含药血清高于80μl时能显著抑制睾丸间质细胞的睾酮分泌,睾丸间质细胞内的cAMP浓度显著降低(p<0.05);加入潞党参含药血清高于40μl时能使睾丸间质细胞的睾酮分泌显著降低,睾丸间质细胞内的cAMP浓度县著降低(p<0.05)。结论:藏党参和潞党参水提液中的成分能够被雄性大鼠吸收,代谢形成藏党参和潞党参的血清药效物质,从而对雄性大鼠生殖系统产生药理作用。藏党参和潞党参血清中的药效成分可能通过cAMP信号传导途径抑制睾酮的合成。藏党参和潞党参水提液中的药效物质可抑制幼龄大鼠和成龄大鼠生殖系统的生长和发育。提示,在临床上不宜长时间或大剂量单独服用藏党参或潞党参,需与其他药物合理配方。
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