用高效液相色谱进行对映体的光学拆分己成为现代合成化学、生物医药学及农药化学等领域中必不可少的工具之一。在手性化合物的直接拆分中,固定相是实现手性分离的关键,其中,多糖类手性固定相是广泛使用的手性固定相之一。本文从保留因子（k）、分离因子（a）和分离度（Rs）等方面考察了Chiralcel OD-H、Chiralpak AD-H、Chiralpak IA色谱柱对系列α-氨基膦酸酯类化合物的手性分离效果,考察了分子结构、柱温、醇类添加剂的种类及浓度等因素对手性分离的影响。选用了一种新型键合型淀粉-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）手性色谱柱（Chiralpak IA）,在正相系统的高效液相色谱条件下首次拆分制备了系列α-氨基膦酸酯类化合物。研究结果表明,不同手性固定相对化合物具有不同的手性分离效果,即使是相同手性固定相,和硅胶载体的连接方式不同,对化合物也呈现不同的手性分离能力。化合物结构和流动相组成、极性调节剂的浓度、柱温等对手性分离产生重要影响。根据实验结果,对溶质在手性固定相上的分离机理作了初步探讨。对在Chiralpak IA柱上分离效果比较理想的18个外消旋体进行了手性制备,获得36个纯的单一对映异构体。色谱法检测单一对映体光学纯度大部分大于98%。部分化合物通过¹H NMR进一步作了确认。培养出化合物（-）-a₃-I的单晶,用X-衍射确认其构型为S型。经初步抗烟草花叶病毒活性试验,结果表明（+）和（-）的对映异构体活性差异不大。