杆状病毒是一类昆虫DNA病毒。杆状病毒在基因组复制、转录、蛋白质翻译和修饰以及信号转导等过程中发生大量的蛋白-蛋白相互作用。苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)是杆状病毒的代表种。AcMNPV39k是一种滞早期基因,在病毒感染早、晚期均有表达。39K蛋白在受感染细胞的细胞核中大量分布,与“病毒发生基质”(VS)有关；与晚期基因的表达调控有关。本研究以AcMNPV39k为诱饵基因,利用酵母双杂交技术从宿主Sf9细胞cDNA文库中筛选与39K相互作用的宿主细胞蛋白基因,取得了如下结果：(一)与AcMNPV39k蛋白相互作用的宿主Sf9细胞蛋白基因的筛选。以AcMNPV39k为诱饵,通过酵母双杂交实验从Sf9细胞cDNA文库中筛选出17个阳性克隆。测序分析结果显示,这些阳性克隆分别编码5种蛋白,包括2a(Ⅹ)、肌特性蛋白300(muscle-specific protein300).GPI-anchor转酰胺基酶复合物、84KDa胞吐囊复合物成分、翻译起始因子2同源物。(二)AcMNPV39K与X蛋白的双荧光亚细胞共定位分析。利用Bac-to-Bac系统构建表达39K-EGFP和X-RFP融合蛋白的重组病毒,用于转染一感染Sf9细胞.共聚焦显微镜观察分析结果显示,39K-EGFP和XBP1-RFP均定位于受感染细胞核内,且二者的分布区域相互重叠,展现共定位现象。(三)AcMNPV39k与X蛋白的双分子荧光互补实验分析。将39k和x分别与YFP的N-端和C-端编码序列融合并转座到AcMNPV构建重组病毒,感染Sf9细胞。受感染细胞核内呈现黄色荧光,与双荧光共定位实验结果一致。(四)AcMNPV39k与X蛋白的免疫共沉淀实验分析。用原核表达和纯化的AcMNPV39k蛋白为抗原免疫小白鼠,制备多克隆抗体；利用Bac-to-Bac系统构建表达X-His融合蛋白重组病毒；用39K抗体处理受感染细胞裂解物。实验结果显示X与39K共沉淀,进一步证实二者之间具有相互作用。