紫杉烯合酶基因表达载体的构建及转化丝状真菌的研究

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snake840321
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紫杉醇是来源于红豆杉的重要临床抗癌药物,其生物合成的研究在新药开发上具有重要意义.紫杉烯合酶(taxadiene synthase,TS),是紫杉醇生物合成途径的第一个关键酶,催化牻牛基焦磷酸(geranylgerany1 diphosphate, GGPP)形成4(5),11(12)-紫杉烯,而GGPP也是大多数萜类化合物生物合成的前体.将TS基因导入合适的宿主菌(丝状真菌)后,则有可能产生重组酶而催化宿主菌的GGPP生成紫杉烯,还可能与宿主菌的其它酶系组合起来催化产生新的紫杉烷类似物,这在组合生物合成、组合生物催化研究上具有重要意义.为了进一步考察该基因在丝状真菌中的表达情况,尤其是对重组菌的次生代谢是否产生影响,该文利用含有TS基因(全基因cDNA编码序列)的真菌融合表达载体pIMTS、pITS(本室构建),对赤霉菌进行了转化,获得一些阳性转化子,对带有TS基因融合表达载体在赤霉菌中重组表达,及新化合物的形成进行了初步研究.
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