金属离子诱导人单核细胞凋亡并释放肿瘤坏死因子的实验研究

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目的:观察金属离子Co2+、Cr3+诱导人单核细胞的生物反应过程中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达以及人单核细胞凋亡的动态变化。探讨人工关节假体松动中磨损产物金属离子Co2+、Cr3+引发假体周围骨溶解的作用机制。方法:将CoCl2粉末与CrCl3粉末溶于无菌注射用水配制成CoCl2溶液和CrCl3溶液。从健康人外周血提取单核细胞,单核细胞在24孔板培养,每孔4×106。实验分组:A组(对照组)为单核细胞单独培养;B组(实验组)单核细胞+Co2+;C组(实验组)单核细胞+Cr3+。分别于12h、24h、48h用ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,并将细胞悬液上流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:①实验组12h后上清液TNF-α量明显高于对照组,且24h实验组TNF-α量明显高于其它时间点实验组(P<0.05)。②各时间点实验组细胞凋亡率均高于空白对照组,48小时实验组细胞凋亡率明显高于各组(P<0.05)。结论:金属离子Co2+与Cr3+均能刺激人单核细胞分泌肿瘤坏死因子,且肿瘤坏死因子量呈时间依赖性,随时间延长含量逐步升高,在24h时达到峰值后逐步下降。Co2+和Cr3+与人单核细胞培养后,能诱发人单核细胞凋亡,随时间延长凋亡率逐步升高。Co2+、Cr3+能通过刺激人单核细胞释放肿瘤坏死因子并诱发人单核细胞凋亡导致假体周围骨溶解,进而引起假体松动。
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