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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),又名呕吐毒素(vomitoxin,VT),是由镰刀菌属病原真菌产生的真菌毒素之一。不同动物对DON毒性敏感性存在很大差异,针对不同动物,DON毒性作用大小顺序为:猪>小鼠>大鼠>家禽≈反刍动物。本研究选用正常鸡胚成纤维细胞株--DF-1为研究对象,探讨DON对DF-1细胞的毒性作用及其可能的机制,旨在为评估DON对家禽的危害性提供实验室依据。实验采用WST-8法、荧光染色、流式细胞术、实时荧光定量PCR等方法,研究DON对DF-1细胞增殖、细胞周期、氧化应激、线粒体膜电位、细胞因子、细胞凋亡及凋亡相关基因表达等的影响,得到如下结果: (1)DON可显著改变DF-1细胞形态,显著抑制DF-1细胞活力,并呈时间剂量依赖关系。 (2)DON诱导DF-1细胞发生G2/M期或G0/G1期细胞周期阻滞,显著抑制DF-1细胞增殖。 (3)DON通过诱导DF-1细胞活性氧(ROS)生成、降低抗氧化酶(如SOD)活性、减少抗氧化剂(如GSH)生成等方式,诱导DF-1细胞发生氧化应激。 (4)DON抑制DF-1细胞蛋白质合成。 (5)DON可降低DF-1细胞线粒体膜电位,诱导DF-1细胞发生凋亡。 (6)DON通过促进线粒体介导细胞凋亡信号通路和死亡受体介导细胞凋亡信号通路关键基因(caspase-3、caspase-8、caspase-9)的表达,以及非caspase依赖性凋亡诱导因子AIF基因的表达,来诱导DF-1细胞的凋亡。 (7)通过启动NF-κB凋亡抑制信号通路有关基因(IGF-1、NF-κB、IL-6、XIAP)的表达,以及线粒体上抑凋亡基因Bcl-2的表达,降低DON自身对DF-1细胞凋亡的诱导作用。 结论:脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对DF-1细胞毒性作用,表现为诱导氧化应激发生和细胞凋亡。