基于二氧化钛纳米管的高灵敏电致化学发光免疫传感器的研究

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1gG是人体中一种免疫活性球蛋白,其含量与人体自身的一些免疫性疾病及慢性疾病有关,故对其检测具有较强的临床意义。传统的免疫检测法不能进行快速、准确的定量测定。所以,发展灵敏、可靠、低成本的传感方法用于临床诊断是十分必要的。本论文将纳米技术、免疫分析技术和电致化学发光技术相结合,发展了一系列新型的快速、灵敏、高特异性的电致化学发光免疫传感器。第一章简要综述了免疫传感器的检测原理、分类以及生物分子的固定化方法,电致化学发光的原理、特点以及电致化学发光免疫传感器,纳米材料在免疫传感器中的应用。第二章发展了一种基于CdS纳米晶(NCs)修饰的二氧化钛纳米管(TiNT)阵列的高灵敏的ECL免疫传感器。采用阳极氧化法制备的TiNT阵列管长约为0.8μm,管径为150±10nm。利用连续化学浴沉积技术(CBD)在TiNT上修饰CdS NCs,由于垂直的、结构整齐的管状结构,使得CdS/TiNT的ECL信号显著地增大,ECL信号强度随着CdSNCs的修饰量而改变,且组装CdS NCs为10层时(CdS10/TiNT)的ECL信号最大,其信号强度约是平面电极(CdS10/TiCL)的5倍。基于CdS/TiNT复合纳米管利用夹心免疫反应通过ECL信号猝灭对抗原进行高灵敏检测,检出限可达1.0fg mL-1。从实验结果可知,TiNT提供了一种方便、低成本、高灵敏的ECL新型免疫分析平台。第三章发展了一种基于TiNT的以CdTe QDs修饰的YiO2纳米粒子(TiNP/QDs)作为免疫标签的多功能免疫传感器,并成功用于构建信号放大的电致化学发光免疫传感器。在本方法中,TiO2纳米粒子(TiNP)由于具有较大的比表面积,而被用作固定CdTeQDs的载体,抗体通过共价键合与TiNP上的CdTe QDs链接,以CdTe QDs修饰的TiNP (TiNP/QDs)作为免疫标签,通过夹心免疫反应链接到具有大比表面积的TiNT管壁,由于CdTe QDs的高负载量使得检测信号放大。与传统的非放大方法相比,该免疫传感器的电致化学发光(ECL)和方波伏安法(SWV)免疫检测信号分别提高了10.3倍和15倍,检出限分别是0.05pg mL-1和0.005pg mL-1。该传感器从多方面实现了免疫信号的放大,检测灵敏度高,重现性和再生性好,精密度高。
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