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目的和意义:红鲫( Carrassiusaurratus red variety)作为实验动物,在急性毒理实验、水环境重金属污染和农药杀虫剂污染监测等方面有重要的应用价值。本实验室已采用雌核发育技术,培育了一批纯系红鲫。为了实验动物国家注册作准备,并为长期保持该品系不发生遗传漂变提供检测标准,从同工酶、血液生化、染色体组型等几个方面对该雌核发育红鲫进行了分析,建立了部分遗传概貌和生化遗传标记。 第一部分:同工酶凝胶电泳分析 方法:采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直电泳法,对雌核发育红鲫与普通红鲫红细胞中的苹果酸脱氢酶(MDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶(EST)和超氧化物歧化酶(SOD)等同工酶进行了分析。 结果:6尾雌核发育红鲫和4尾普通红鲫的MDH同工酶电泳谱带为3条,且带型一致;2尾普通红鲫的MDH同工酶电泳谱带为5条。雌核发育红鲫与普通红鲫的LDH同工酶电泳谱带一致,均为9条。雌核发育红鲫EST同工酶电泳谱带为2-3条,普通红鲫的为1-3条。雌核发育红鲫的SOD同工酶电泳谱带为8条,普通红鲫的为6条,雌核发育红鲫比普通红鲫在SOD-3、SOD-8多出两条带,两种鱼各自的带型一致。 结论:SOD同工酶的SOD-3、SOD-8电泳谱带可以作为雌核发育红鲫的生化遗传标记。雌核发育红鲫的MDH、LDH和SOD同工酶电泳谱带分别为3、9和8条。 第二部分:血液生化分析 方法:采用全自动生化分析仪,对雌核发育红鲫和普通红鲫血液中的血糖、胆固醇、甘油三酯等17项血清成份进行了测定和分析。 结果:雌核发育红鲫:TP(g/l)29.74±1.73,ALB(g/l)10.02±1.89, GLB(g/l)19.72±1.62,AST(U/l)7158±1335,ALT(U/l)1124±476, ALP( U/l)148.4±57.5, LDH(U/l)148.4±139.7,GLU(mmol/l)4.43±1.22,TG(mmol/l)2.02±0.71,TC(mmol/l)4.87±0.38,K+(mmol/l)1.30±0.53, Na+(mmol/l)132.2±2.6, Cl-(mmol/l)114.6±3.4,Ca2+(mmol/l)2.62±0.29,IP(mmol/l)2.66±0.63, Mg2+(mmol/l)1.69±0.20,BUN(mmol/l)1.77±0.20。 普通红鲫:TP(g/l)28.38±2.08,ALB(g/l)9.88±1.44,GLB(g/l)18.5±1.16,AST(U/l)6712±2874,ALT(U/l)681±270,ALP(U/l)153.8±32.7,LDH(U/l)162.0±109.9,GLU(mmol/l)5.00±0.96, TG(mmol/l)2.02±0.74, TC(mmol/l)4.30±0.84, K+(mmol/l)1.97±0.72,Na+(mmol/l)135.3±2.8,Cl-(mmol/l)119.7±2.7,Ca2+(mmol/l)3.03±0.33,IP(mmol/l)3.65±0.45,Mg2+(mmol/l)2.18±0.32,BUN(mmol/l)1.90±0.27。 结论:雌核发育红鲫和普通红鲫的各血液生化指标值无显著差异。 第三部分:染色体组型分析 方法:采用肾细胞染色体制片的方法,对雌核发育红鲫和普通红鲫的染色体组型进行了分析。 结果:雌核发育红鲫二倍体染色体数为2n=100,染色体组型公式为22m+30sm+24st+24t。 普通红鲫二倍体染色体数为2n=100,染色体组型公式为22m+30sm+24st+24t。 结论:雌核发育红鲫和普通红鲫为二倍体,染色体数目为100条。两种红鲫核型一致,染色体组型公式均为22m+30sm+24st+24t。