副猪嗜血杆菌动物模型的建立及其在模型动物体内的移行分布

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副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)是猪Glasser’s病的病原体,引起猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎。随着养猪业的发展,该病近年在世界范围流行逐渐呈上升趋势,给养猪业造成巨大经济损失。我国在1995年发现本病,经病原学和流行病学研究表明,现已遍及大多数省、市,成为影响我国养猪业发展的重要细菌病之一。本试验通过用HPS血清5型标准菌株(Strain Nagasaki)接种液体培养基,在37℃,200r/min条件下培养,取不同时间点和浓度的液体培养物,接种实验动物,探索HPS的液体培养物感染动物的最佳时间。并进行了Strain Nagasaki对部分常用的不同品种品系的SPF小鼠、大白鼠、金黄地鼠、豚鼠以及清洁级豚鼠和兔子的致病性试验,筛选出易感的实验动物。通过对易感动物的感染试验,观察临床病理变化,进行与本动物的临床病理变化比较,以及病原在实验动物体内的纯分离鉴定,初步建立了HPS感染动物模型。以1.30×109CFU(0.2ml)气管感染模型动物,感染后6h、8h、10h、12h、13h、14h和16h不同的时间段,取模型动物的主要组织器官大脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏,通过免疫组化结合病原的分离,检测HPS在模型动物体内的移行分布。实验结果表明,在培养10~13h,菌数达109CFU/ml及以上,是HPS感染动物的最佳时间段;经过对几种实验动物的感染比较,发现豚鼠对HPS最为敏感;通过对豚鼠的临床病理变化与猪临床病理变化的比较,结果表明豚鼠与猪Glasser’s病有相似的病理变化,初步确定豚鼠为HPS理想的感染模型动物;免疫组化检测结果显示:在感染后6h,首先肺脏呈现弱阳性;感染后8h时,肺脏和肾脏呈现出阳性;感染后10h时,肝脏和脾脏呈现阳性;感染后12h时,心脏呈现阳性;感染后14h时;大脑呈现阳性。本试验为副猪嗜血杆菌病的发病机理、诊断及免疫研究提供了理论基础。
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