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目的研究长链非编码RNAMEG3(Maternally expressed gene3)在非诺贝特抑制胰腺癌细胞中的作用。方法1.培养人胰腺癌细胞株PANC-1及SW1990,经非诺贝特孵育后MTT法及平板克隆实验测定给药前后两种细胞的增殖效率,得出给药适宜浓度及时间作为后续实验条件。2.对给药前后的PANC-1细胞进行长链非编码RNA基因芯片检测,筛选表达差异显著的LncRNA。3.RT-PCR法检测给药前后MEG3表达情况。构建MEG3-SiRNA并导入PANC-1细胞,转染后的细胞记为SiRNAPANC-1细胞,RT-PCR检测该细胞中MEG3表达变化。给药后MTT法检测SiRNA PANC-1细胞增殖情况,Western Blot法检测p53蛋白水平。4.构建pcDNA3.0-MEG3重组质粒并导入PANC-1细胞,记转染后细胞为pcDNA PANC-1细胞,RT-PCR检测转染前后细胞中MEG3表达情况,MTT法及平板克隆实验检测转染前后细胞的增殖效率,Western Blot法检测转染前后细胞中p53蛋白表达水平变化。结果1.MTT法示非诺贝特浓度为100μM、孵育2小时抑制细胞增殖可达50%左右,且PANC-1细胞较SW1990细胞对非诺贝特更敏感,故后续实验采用PANC-1细胞,以100μM非诺贝特孵育2小时为给药条件。2.长链非编码RNA基因芯片结果示给药后MEG3表达增高,p53信号通路激活。3.RT-PCR结果示给药后PANC-1细胞中MEG3表达增强,转染后SiRNAPANC-1细胞中MEG3表达较转染前明显下降。MTT结果示给药后SiRNAPANC-1细胞增殖效率较PANC-1细胞明显增高。Western Blot示给药后SiRNA PANC-1细胞中p53蛋白水平较PANC-1细胞明显减低。4.RT-PCR结果示pcDNAPANC-1细胞中MEG3表达较PANC-1细胞增强。MTT法及平板克隆实验结果示pcDNA PANC-1细胞增殖效率较PANC-1细胞减弱。Western Blot法结果示pcDNAPANC-1细胞p53表达水平较PANC-1细胞增高。结论1.非诺贝特能抑制胰腺癌细胞株PANC-1及SW1990增殖。2.非诺贝特能上调胰腺癌细胞株PANC-1 MEG3表达水平,并激活p53信号通路。3.下调MEG3表达后非诺贝特抗PANC-1细胞增殖效应明显削弱,p53蛋白水平降低;同时,MEG3过表达后PANC-1细胞增殖效率降低,p53蛋白水平提高。故研究结论考虑非诺贝特通过上调LncRNAMEG3激活p53通路,最终抑制胰腺癌细胞株PANC-1增殖。