生物钟基因Per3调节紊乱对肝癌发生发展的作用及机制

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目的:(1)分析肝癌组织中PER3蛋白的表达与肝癌患者临床和病理特征及生存期的关系。(2)研究Per3基因对肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响。  方法:(1)选取120例肝癌患者的癌组织及癌旁组织,应用免疫组织化学法检测组织中PER3蛋白表达情况,应用SPSS16.0软件进行统计学分析,采用?2检验分析PER3蛋白表达与肝癌患者的临床和病理特征的关系,采用Kaplan-Meier时间生存曲线分析PER3蛋白表达与患者生存时间的关系。(2)构建Per3过表达慢病毒载体。将Per3过表达慢病毒载体(实验组,OE组)和阴性对照慢病毒载体(阴性对照组,NC组)分别感染SMCC-7721肝癌细胞系,并设立SMCC-7721肝癌细胞系为空白对照组(MOCK组)。通过MTT法检测Per3基因过表达对SMCC-7721细胞增殖能力的影响,通过流式细胞术检测Per3基因过表达对SMCC-7721细胞凋亡的影响,通过Transwell小室法检测Per3基因过表达对SMCC-7721细胞侵袭能力的影响。  结果:(1)肝癌组织中PER3蛋白的表达较癌旁组织显著降低,且在肝癌组织中PER3蛋白低表达的患者肿瘤数目≥2个、瘤体>5cm及伴门静脉侵袭的发生率显著升高(P<0.05)。Per3低表达的HCC患者总体生存率(OS)与无瘤生存率(DFS)均显著降低(P<0.05)。(2)成功构建Per3基因过表达的慢病毒载体。与阴性对照组和空白对照组相比较,Per3基因过表达的SMCC-7721肝癌细胞系的增殖能力下降、凋亡率增加、侵袭能力减弱(P<0.05)。  结论:(1)PER3蛋白在肝癌组织中呈低表达,与患者肿瘤数目、大小、门脉侵袭密切相关,并影响患者的OS和DFS,提示PER3蛋白可作为HCC患者肝切除术后的预后指标。(2)Per3基因过表达可使肝癌细胞增殖能力下降、凋亡率增加、侵袭能力减弱,提示Per3基因具有抑癌基因的作用,这为肝癌的临床防治提供新的视角和思路。
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