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邻苯二甲酸酯(Phthalic Acid Esters,PAEs)属于环境内分泌干扰物(Environmental Endocrine Disrupting Chemicals,EDCs),可通过空气、食物等途径进入体内蓄积。研究发现PAEs在男性体内具有类雌激素样作用,干扰生殖系统发育,使精子减少、畸形或形成中止,导致生殖能力下降或丧失。因此,本课题以107名男性不育者和54名正常已育男性为调查对象,收集一般资料和精液样本,采用单细胞凝胶电泳实验(single cell gel electrophoresis,SCGE)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)技术,研究男性不育者精液中5种PAEs(邻苯二甲酸二乙酯(di-ethyl phthalate,DEP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(butyl benzyl phthalate,BBP)、邻苯二甲酸二正丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)和邻苯二甲酸二正辛酯(di-n-octyl phthalate,DnOP))蓄积水平与精子DNA损伤关系,探讨PAEs对男性生殖功能的影响。所得结论如下:
1、不育者年龄主要集中在30~35岁,平均年龄28.5岁,平均不育时间为3.5年:在7个相关危险因素(BMI、不育时间、职业、吸烟、饮酒、饮用水类型、副食品摄入类型)分析中,BMI和不育时间是影响精液质量的危险因素。
2、采用SCGE技术检测调查对象精子DNA损伤程度。结果显示,实验组DNA普遍呈现损伤,彗星图像明显,对照组只有少数精子DNA呈损伤状态,多项指标比较均有统计学意义,P<0.05。
3、采用的Discovery Cx。柱分离,HPLC紫外检测器检测调查对象精液中5种PAEs蓄积水平和种类。结果显示:实验组精液中5种PAEs含量在0.9~305μg/L之间。检出率分别为:DEP(43.93%)、BBP(70.09%)、DBP(60.75%)、DEHP(81.31%)和DnOP(37.38%);对照组中5种PAEs含量分布在0.9~84.2μg/L范围,检出率分别为:DEP (55.56%)、BBP (68.52%)、DBP (44.44%)、DEHP(57.41%)和DnOP(38.89%)。两组中PAEs蓄积水平t检验结果显示:实验组PAEs含量明显高于对照组,两组问有显著性差异,P<0.05。
4、PAEs蓄积水平与精子DNA损伤程度相关性采用spearman秩相关非参数检验方法进行分析,结果显示实验组中5种PAEs蓄积水平与DNA损伤指标存在相关性,P<0.05。