论文部分内容阅读
鸡球虫病是严重危害养鸡业的寄生虫病之一,给养鸡业造成了重大的经济损失。其中鸡柔嫩艾美耳球虫是致病力最强的一种球虫,主要侵害盲肠及其附近肠道上皮细胞。长期以来,鸡柔嫩艾美耳球虫病主要依靠抗生素类、化学合成类药物进行防治,但由于鸡球虫病极易产生耐药性,给药物防治带来了困难。近些年来,应用中草药防治鸡球虫病的研究取得了一定进展。青蒿具有清热解暑,除虱,截疟的功效。现代药理研究表明青蒿具有抗菌、抗寄生虫、抗炎及提高免疫力作用,在防治鸡球虫病方面表现出良好的态势。本课题在总结青蒿防治鸡球虫病研究基础上,以青蒿为主组成复方制剂,研究其对鸡球虫病的防治及作用机制,以便为临床应用提供理论基础。第一,将青蒿复方制成复方青蒿颗粒剂和复方青蒿注射液,并对其进行性状考察和有效成分鉴别,以控制该制剂的质量。第二,用鸡柔嫩艾美耳球虫感染健康雏鸡,从体内外探讨复方青蒿制剂对鸡柔嫩艾美耳球虫病的防治作用,为临床用药提供理论依据。结果表明,复方青蒿制剂对球虫卵囊孢子化率有明显的抑制作用,和模型组比较差异显著(P<0.05):复方青蒿颗粒剂和复方青蒿注射液均能明显的提高感染鸡的成活率和相对增重率,显著减少血便堆数和卵囊数,减轻盲肠病变;并能逆转球虫感染造成雏鸡的红细胞数降低和白细胞总数升高,增加免疫器官指数,对鸡球虫病具有较好的防治作用。第三,通过体外抑菌试验、抗炎试验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验,考察复方青蒿制剂的抑菌活性、抗炎效果和免疫增强功能。试验结果表明,复方青蒿颗粒剂对大肠杆菌的MIC为3.30 mg.ml-1,对金黄色葡萄球菌的MIC值为1.66 mg.ml-1;复方青蒿注射液对大肠杆菌的MIC为1.25 mg.ml-1,对金黄色葡萄球菌的MIC值为0.3125 mg.ml-1,复方青蒿制剂表现出良好的抑菌作用;复方青蒿制剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用,与空白对照组相比呈现显著性差异(P<0.05):同时在考察复方青蒿制剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验可以看出,复方青蒿制剂能明显的提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,从而提高机体免疫功能。第四,将复方青蒿制剂处理后加入到培养的鸡外周血T淋巴细胞中,分别培养24h后用半定量RT-PCR方法检测鸡外周血T淋巴细胞IL-2的mRNA表达的变化,旨在探讨复方青蒿制剂抗鸡柔嫩艾美尔球虫病防治的机理。结果表明复方青蒿制剂能显著促进鸡外周血淋巴细胞IL-2的基因表达,和空白对照组比较差异显著(P<0.05),推测复方青蒿制剂通过促进鸡外周血T淋巴细胞IL-2mRNA表达,提高IL—2的诱生效应,刺激T淋巴细胞增殖和分化,增强机体的细胞免疫功能。本研究表明,复方青蒿制剂可通过促进机体外周血T淋巴细胞IL-2的基因表达作用,提高机体的细胞免疫力,抑制鸡柔嫩艾美尔球虫虫卵囊孢子化和提高其抗球虫指数,并具有较好的抗炎、抑菌作用,以防治鸡柔嫩艾美尔球虫对感染鸡的损伤。