ckrc类突变体筛选体系的应用与rw1(y81)的研究

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanqingnan
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
生长素发现至今已有130余年,经过科学工作者们不懈的努力,在生长素的合成、信号传导、运输方面的研究都取得了一定的进展,然而在生长素的研究中还存在很多问题。就生长素合成方面而言,存在多种途径交叉形成的网络,很多基因是未知的,且各种途径的调节和相互关系很多也是未知的。由于生长素在植物的生长发育中起关键的调节作用以及大量冗余基因的存在,很难筛选到内源生长素降低的突变体。本文系统阐述了本实验室建立的生长素缺陷筛选体系。体系建立在对ckrc1/taa1突变体的研究基础上。细胞分裂素促进生长素的合成,但是抑制生长素的运输,当CKRC1基因突变时,生长素在根中的含量减少,从而使突变体在含有0.1μM玉米素存在的情况下,产生了根卷曲的易于辨认的表型,这个表型可以让我们方便地筛选出更多生长素合成相关的突变体本工作从PSKI015中T-DNA插入的突变体库CS31100中筛选了近360,000棵幼苗,获得了17个突变体。通过生化互补,遗传等位分析,热不对称交错式PCR(Tail-PCR),反向PCR(Inverse-PCR),基因芯片和基因组重测序等技术,确定了其中16突变基因为已知基因,其中有7个AUX1的等位突变、6个CKRC1/TAA1的等位突变、1个WEI7的等位突变、1个WEI2的等位突变、1个PIN2的等位突变,,1个未知突变体,命名为y81(root wave1,rw1).表型实验研究表明,rw1(y81)突变体种植在0.1μMtZ平板上,根具有波浪状的表型,这种表型能够被外源生长素(IAA,2,4-D和NAA)恢复。培养基中生长7天的幼苗主根长度和下胚轴长度明显短于野生型,这是低生长素的表型。另外GC-MS分析rw1(y81)幼苗中生长素的含量,也表明rw1(y81)的生长素含量明显低于野生型。通过基因组重测序技术已经在rw1(y81)突变体中发现了4个T-DNA插入和近15,000个单核苷酸多态性,包括Col-2与Col-0生态背景不同的单核苷酸多态性(SNP)。用外源生长素和细胞分裂素处理rw1(y81),分析生长素和细胞分裂素初级响应基因IAA1/IAA2和ARR5/ARR15的表达,与野生型无差别,表明rw1(y81)的生长素和细胞分裂素信号通路正常。IBA-IAA的稳态平衡影响IAA的平衡,通过IBA处理后rw1(y81)的响应情况,发现其与野生型存在明显差异,表明rw1(y81)可能参与到影响IBA-IAA稳态的过程中。综上所述,我们的实验结果表明,我们建立的细胞分裂素诱导根卷曲的筛选体系是高度有效的。我们从近360,000粒种子中筛选到的rw1(y81)突变体,极可能是一个新的未知的参与生长素稳态调节的突变体。
其他文献
物种丰富度沿环境梯度变化的决定因素一直是生态学研究的重点之一,理解物种丰富度的一般性决定因素对物种保护尤为重要。影响物种丰富度的因素大体包括两个方面:环境因素和生物因素。关于物种丰富度的环境决定因素,已有很多种假说被提出但是只有一小部分对物种丰富度有潜在的预测能力。环境异质性假说和能量假说中的生产力假说都是被频繁讨论的对象,但仍没有一个共识性结论。除了被广泛证据支持的物种丰富度与环境异质性之间的正
2000年以来,全球增暖过程中出现了增暖速度减缓的阶段性特征,部分学者称之为“全球增暖的停滞(Global Warming Hiatus)”。同期,欧亚大陆冬季冷事件频繁发生。由此,气象工作者再度将注意力转向关于冬季低温事件的研究。对冬季低温事件研究必然会涉及如下的一些科学问题:(1)如何客观识别区域性低温事件(Regional Low Temperature Event,RLTE),近50多年R
本博士学位论文主要考虑了几类具有复杂非线性项的椭圆问题解的存在性及多解性.在这里,复杂非线性是指:带有非线性边界条件,算子是非线性的,外力项不满足(AR)条件.本文共有六章:第一章是绪论,主要介绍了本文的研究背景,研究的问题以及得到的主要结论.第二章是预备知识,介绍了后面要用到的比较原理,非线性泛函分析知识,变分法以及椭圆方程的一些重要的结论.第三章,我们研究了有界区域上的带有非线性边界条件的椭圆
n-维超立方图Qn的顶点集是所有的长为n的二元串(binary string),其中的两个顶点相邻当且仅当它们恰好只在一个坐标上不同.超立方在很多方面都有应用,比如在编码理论,计算机系统结构,数学化学和种系遗传学等领域.如果一个图G能等距离地嵌入到超立方,则称G为一个部分立方图(partial cube)部分立方图在区位理论,网络理论和化学图论中都有应用背景.注意到Qn中的两个顶点的距离就是它们的
包含图中所有顶点的圈(或路)称为哈密尔顿圈(或哈密尔顿路).含哈密尔顿圈的图称为哈密尔顿图.判断一个给定的图是否哈密尔顿图的问题是NP-完全问题.哈密尔顿圈或路的存在性问题是图论中的一个重要的研究分支.由于运筹学,计算机科学和编码理论中的很多问题都可以转化成哈密尔顿问题,从而引起了广泛的关注和研究.超立方是应用最广泛和最有效的互连网络之一.有大量的文献和资料研究超立方的图论性质和它在并行计算机中的
目标跟踪作为计算机视觉的重要方向之一,在自动驾驶、安防监控等方面有着广泛的应用,但是目标跟踪算法还无法有效地运行在嵌入式设备上。针对目标跟踪算法计算量大、复杂度高,难以部署在资源受限的嵌入式设备的问题,提出了一种基于相关滤波目标跟踪的加速方案。首先采用自适应模糊算法优化了跟踪算法整体运算量,它可以根据目标跟踪框的尺寸判定是否降低图像质量。其次采用了跟踪响应结果的峰值旁瓣比与平均相关能量比判据来评估
在过去的几十年中,随着实验技术的发展,实验上发现了越来越多的轻介子。此时,迫切需要一个对轻介子家族的系统研究。如何把这些粒子在轻介子的框架下进行归类成为一个非常重要的课题。而对轻介子的质量谱及Okubo-Zweig-Iizuka (OZI)规则允许的两体强衰变行为的系统研究是其中的一个十分有效的方案。本博士论文首次系统研究了同位旋矢量轻介子、同位旋标量轻介子及K介子家族的谱学及强衰变行为。我们借助
制备高品质的光腔、实现原子与腔场的强耦合,以及编织大尺度耦合腔阵列技术的发展使得耦合腔阵列成为一种潜在的量子模拟器,人们希望它能有助于量子信息的发展和量子计算机的实现。光子是量子信息传输的理想载体,在调控单光子的理论和实验研究中,人们发现耦合腔阵列可以用来实现光子的传输。控制单光子在耦合腔阵列中传输是目前研究的热点,已经引起了理论和实验研究方面的广泛注意。许多研究小组已经提出了多种控制单光子在耦合
洗牌积在代数,组合和拓扑中是非常重要的一个概念,近些年它的一些推广形式逐步应用在其他的学科当中.本文主要从代数和数论两方面研究了洗牌积的应用.罗巴(Rota-Baxter)代数最初是出现在概率论中,之后作为一个基本结构出现在有关量子场论重整规划的研究中.罗巴代数也与结合杨-巴克斯特方程及叶形(dendriform)代数联系到一起.自由交换的罗巴代数可用混合洗牌积的乘法构造出后,就开始了交换罗巴代数
在动物繁殖过程中,亲本抚育可增大后代的存活率,但也会消耗亲本较多的能量,影响亲本自身的生存和再繁殖机会等。亲本在抚育后代时,需面对当前投入与未来繁殖的权衡,还需妥善处理配偶间和亲子间等家庭内部关系。然而,不同动物在亲本抚育中可采取不同的策略,亲本如何在抚育后代时处理自身权衡以及家庭关系尚未被研究清楚。鸟类主要采取单配的婚配制度和双亲抚育的家庭模式繁殖后代,为研究亲本抚育提供了良好的素材。本研究以青