环境内分泌干扰物是指环境中存在的一类物质,可以模拟天然激素的作用,扰乱内分泌系统的正常功能,包括激素的合成、分泌、转运、结合、生物效应及清除、对人类健康和野生动物造成极大的威胁。双酚A（bisphenol A,BPA）是一种用途非常广泛的工业用化合物,广泛用于碳酸聚酯、环氧树脂及相关产品的制造。已经有许多研究资料表明,BPA具有雌激素活性,是一种具有代表性的内分泌干扰物。BPA对生殖系统的研究报道已经很多,但是对于中枢神经系统影响的研究较少。N-甲基-D-天冬氨酸（N-methy-D-aspartate,NMDA）受体（N-methy-D-aspartate Receptor,NR）是谷氨酸受体的一种,每个NMDA受体由一个NR1亚基和NR2A、NR2B、NR2C、NR2D亚基中的至少一个共同组成,它们在脑内广泛分布,为所有兴奋性突触的突触后必需组份,参与调节神经元的存活和迁移、树突和轴突结构发育、突触可塑性、神经回路形成、LTP的诱导以及记忆行为。鉴于NMDA受体在脑发育中的重要作用,雌激素与中枢神经系统的发育密切相关,本课题通过在围生期（孕期和哺乳期）进行母体BPA染毒,观察发育期间BPA暴露对雄性子一代大鼠NMDA受体表达和亚基组成、ERβ（Estrogen Receptor beta,ERβ）和雌激素合成关键酶P450arom表达的影响。为初步探索内分泌干扰物对中枢神经系统（Central Nervous System,CNS）的影响的分子机制奠定基础。方法:分笼饲养雌雄SD大鼠,观察1周后,于每日20:00按雌:雄比例为2:1合笼交配。次日08:00检查阴栓并对雌性大鼠阴道进行涂片检查精子,凡查到精子定为妊娠第0天。将妊娠大鼠随机分为5个剂量组（将BPA溶于食用色拉油,BPA浓度分别为200、50、5、0.5 mg/kg/day）和1个对照组（食用色拉油）,从妊娠第7天开始,每日08:00～09:00灌胃染毒,灌胃体积约为1 ml,直至仔鼠出生后（postnatal day,PND）21天（断乳期）止。仔鼠出生后,在PND4鉴定仔鼠性别,在PND 21将仔鼠雌雄分笼饲养。按实验要求将出生后不同时间（PND 4、7、14、21、56）的雄性仔鼠断颈处死,立即取出海马和前皮层组织,液氮冷冻后储存于-70℃的冰箱直至使用。采用Western-blot方法,用兔来源多克隆NR1,NR2A,NR2B和ERβ抗体,以及小鼠来源多克隆P450arom抗体来检测相应蛋白的表达。以β-actin蛋白表达量作为内参。结果:1.在海马区,较低剂量（0.5～50 mg/kg/day）BPA剂量依赖性地下调NMDA受体亚基表达;高剂量（200 mg/kg/day）BPA使NR1表达下调最显著,却对NR2A、2B的影响最小;但所有BPA剂量组的NMDA受体亚基表达均显著低于对照组。在前皮层,NMDA受体亚基表达对BPA的敏感性相对较低,只有较高剂量（50～200 mg/kg/day）BPA可明显下调NR2A、2B亚基表达。此外,BPA明显改变NMDAR的亚基组成,NR2A/NR1和NR2B/NR1比值在海马区被200mg/kg/d BPA上调,在前皮层却被0.5 mg/kg/d BPA上调;其它剂量BPA均下调两脑区的该比值。2.在海马组织内,BPA下调ERB蛋白的表达,并且具有一定剂量关系趋势,尤其在对出生后1周的子代雄性大鼠的影响更加明显。而在皮层组织内,虽然BPA也下调ERβ蛋白表达,但是低剂量（0.5,5mg/kg/d）影响不明显。较高剂量（50,200mg/kg/d）对出生后子代大鼠整个发育阶段都有明显下调ERβ蛋白的表达（P＜0.05,P＜0.01或P＜0.001）。3.在海马组织内,BPA上调P450arom蛋白的表达,BPA对出生后3周内的子代大鼠影响更为明显（P＜0.5,P＜0.01或P＜0.001）。而在皮层组织内,BPA对出生后整个发育期的P450arom蛋白的表达都有明显的上调作用（P＜0.5,P＜0.01或P＜0.001）,并且具有一定剂量关系趋势。结论:围生期母体BPA暴露,下调出生后发育期海马、前皮层组织内NR1,NR2A,2B亚基表达,并且改变它们的组成变化;下调胎后发育期海马、前皮层组织内ERβ蛋白的表达;上调出生后发育期海马、前皮层组织内P450arom蛋白的表达,并具有一定的剂量关系趋势。BPA下调NMDA受体蛋白表达和改变其组成变化可能与ERβ和P450arom蛋白表达变化有关。