【摘 要】
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本课题选择在血小板无力症患者中新发现的αⅡb1292～1307del、αⅡbA446P及αⅡbG747P这3种突变进行体外表达，并用EGFP标记突变αⅡb后进行细胞内定位研究，旨在明确这些突变
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本课题选择在血小板无力症患者中新发现的αⅡb1292～1307del、αⅡbA446P及αⅡbG747P这3种突变进行体外表达，并用EGFP标记突变αⅡb后进行细胞内定位研究，旨在明确这些突变对αⅡbβ3的合成、转运和表达的影响；探讨其引起血小板无力症的分子发病机制并初步分析相应突变对αⅡbβ3的结构与功能的影响。
为了进行体外转染和表达实验，本研究采用overlap法在野生型的αⅡb表达质粒基础上构建了pcDNA3.1-αⅡb1292～1307del、pcDNA3.1-αⅡbA446P及pcDNA3.1-αⅡbG747P表达质粒。测序结果表明这3种突变αⅡb表达质粒除了目标突变外无其它DNA序列错误。αⅡb亚基突变的研究需要与GPⅢa亚基共表达，本研究建立了可以稳定表达GPⅢa亚基的CHO细胞株。
本研究表明αⅡb1292～1307del、αⅡbA446P及αⅡbG747P这3种突变均不同程度地影响了αⅡbβ3复合物的胞内转运，是血小板无力症的分子发病机制：αⅡb1292～1307del突变使肽链终止于β-propeller的第三和第四个钙离子结合位点，严重影响了αⅡbβ3的合成和正常转运过程。
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