湛江近海域沉积物中DL-PCBs对斑马鱼免疫功能的影响

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类二噁英多氯联苯(dioxin-like polychlorinated biphenyls,DL-PCBs)是全球性的有机污染物。DL-PCBs属于多氯联苯(polychlorinated biphenyls,PCBs),其性质和毒性与二噁英相似。DL-PCBs在环境中难以降解,是亲脂性物质,因此进入动物机体后易长期积聚在体内,尤其是脂肪含量高的部位,具有生殖毒性、发育毒性、皮肤毒性、免疫毒性等。DL-PCBs有迁移性,广泛存在于自然界的空气、水体、土壤、沉积物中,其中河流、湖泊和海洋沉积物是其重要归宿,而海洋沉积物中的DL-PCBs会通过水体再次返回到海洋中,对海洋中的植物和鱼类、虾类、贝类等水生动物造成威胁。海洋中的资源丰富,鱼类、贝类等是很多动物性饲料的重要原料,如鱼粉。若这些饲料中含有DL-PCBs,则会对养殖动物和人类造成危害。免疫系统是保护动物机体健康的最重要防线,免疫系统遭到破坏还会引发其他疾病,损害人类和动物健康。本研究以模式生物斑马鱼为试验动物,提取湛江近海域沉积物中的DL-PCBs,探究湛江近海域中DL-PCBs的污染状况及其对斑马鱼免疫功能的影响。本研究的主要内容有:(1)采集湛江近海域6个采样点的沉积物,用超声波辅助提取、硫酸-高锰酸钾结合佛罗里土柱净化法进行前处理,最后用GC-MS(气相色谱-质谱仪)进行分析,得到湛江近海域沉积物中DL-PCBs的种类和含量;(2)以斑马鱼成鱼为试验动物,设置对照组、阳性对照组、低剂量组和高剂量组,水触媒染毒28 d,探究DL-PCBs对斑马鱼成鱼免疫器官(脾脏、肾脏)的影响;(3)探究DL-PCBs对斑马鱼成鱼免疫细胞(红细胞、白细胞)的影响;(4)探究DL-PCBs对斑马鱼成鱼免疫因子(血清溶菌酶、体表粘液免疫球蛋白和粘液溶菌酶)的影响。研究结果表明:(1)GC-MS检测结果显示:在6个采样点中,金沙湾采样点沉积物中检测到PCB81,浓度为29.0μg/kg,临港工业区采样点沉积物中检测到PCB118,浓度为35.0μg/kg,其余采样点未检测到DL-PCBs(滨湖公园、调顺岛、渔港公园和海滨公园)。(2)与对照组相比,阳性对照组和高剂量组斑马鱼的脾脏指数从第14 d开始显著下降(P<0.05),低剂量组斑马鱼的脾脏指数在第28 d显著下降(P<0.05);斑马鱼肾脏指数的变化恰好与脾脏相反。组织切片观察显示,阳性对照组和高剂量组从第14 d开始,斑马鱼脾脏中出现大量含铁血黄素,淋巴细胞被破坏、数量减少,且高剂量组变化更加明显,低剂量组从第28 d开始有上述病理变化;阳性对照组和高剂量组斑马鱼头肾肾小管上皮细胞明显肿胀、脱落,管腔扩大,肾间质出现水肿等,且高剂量组病变更加明显。低剂量组斑马鱼头肾在第21和28 d也出现轻微肾小管上皮细胞的脱落溶解,肾间质轻微水肿。(3)阳性对照组和高剂量组斑马鱼红细胞数量从第7 d开始显著下降(P<0.05),低剂量组从第21 d开始显著下降(P<0.05);阳性对照组和高剂量组斑马鱼白细胞数量从第7 d开始显著升高(P<0.05),低剂量组从第21 d开始显著升高(P<0.05);阳性对照组和高剂量组斑马鱼白细胞吞噬指数从第14 d开始显著下降(P<0.05),低剂量组白细胞吞噬指数在第28 d显著下降(P<0.05)。(4)阳性对照组和高剂量组斑马鱼血清溶菌酶含量从第21 d开始显著下降(P<0.05),低剂量组血清溶菌酶活性没有显著变化(P>0.05);体表粘液溶菌酶活性和免疫球蛋白含量均从第14 d开始显著下降(P<0.05),低剂量组在第28 d开始显著下降(P<0.05)。
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