【摘 要】
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目的研究生物活性肽治疗CCl_4诱导SD大鼠肝纤维化的作用,探究生物活性肽调控PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬的作用机制。方法将40只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、活性肽组和保肝汤组,每组10只。除空白组外的三组大鼠每周行两次腹腔注射CCl_4,空白组注射等量生理盐水。4周后活性肽组行生物活性肽灌胃,保肝汤组行保肝汤灌胃,空白组和模型组行生理盐水灌胃,每周2次。治疗4周后称重,麻醉动
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目的研究生物活性肽治疗CCl4诱导SD大鼠肝纤维化的作用,探究生物活性肽调控PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬的作用机制。方法将40只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、活性肽组和保肝汤组,每组10只。除空白组外的三组大鼠每周行两次腹腔注射CCl4,空白组注射等量生理盐水。4周后活性肽组行生物活性肽灌胃,保肝汤组行保肝汤灌胃,空白组和模型组行生理盐水灌胃,每周2次。治疗4周后称重,麻醉动物后致死,取血、收集肝脏组织并称重。计算肝指数后部分肝固定,制备石蜡切片,部分冻存于液氮中。肝脏石蜡切片行HE染色、MASSON染色,并通过免疫组织化学染色分析TGF-β1、PINK1与PARKIN蛋白的表达水平。通过血清生化指标ALT、AST的检测判断肝功能。通过ELISA检测肝脏组织内MMP1与TIMP1的水平。RT-q PCR法检测TGF-β1、PINK1与PARKIN基因的表达情况。结果与空白组相比,模型组大鼠的肝指数增加,ALT与AST含量均升高（P<0.05）,肝脏组织出现了明显病变,CCl4造模成功。与模型组大鼠相比,保肝汤组与活性肽组大鼠肝指数下降,ALT与AST水平下调,组织学染色结果表明肝脏组织受损程度得到控制,ELISA检测蛋白显示,MMP1蛋白表达水平增加,TIMP1蛋白表达水平下降（P<0.05）;免疫组织化学染色结果与q PCR结果进一步表明活性肽与保肝汤的治疗上调了PINK1与PARKIN的表达水平（P<0.05）,而显著抑制了TGF-β1表达水平。结论CCl4通过调节炎症趋化因子TGF-β1、介导PINK1与PARKIN的表达从而调控线粒体自噬过程,诱发SD大鼠肝纤维化;活性肽组与保肝汤组均可通过上调PINK1/PARKIN的表达水平从而促进线粒体自噬、下调TGF-β1的表达水平减轻肝纤维化,两种治疗方法都可延缓肝脏结构的改变,具有相同的保护逆转作用。
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