纳他霉素(Natamycin)是一种高效、广谱的真菌类抗生素，主要由恰塔努加链霉菌(Streptomyces chattanovgensis)、纳塔尔链霉菌(S.natalensis)和褐黄孢链霉菌(S.gilvosporeus)等经发酵生产，能有效地抑制酵母菌和霉菌的生长，在医疗、食品等方面显示了良好的应用前景。本论文以纳塔尔链霉菌为试材，重点进行了纳他霉素的定量分析方法、菌种诱变和选育方法、发酵工艺及分离提取等方面的研究。 对二剂量管碟法、紫外分光光度法和高效液相色谱法(HPLC)测定纳他霉素的各项参数进行了研究，最终确定高效液相色谱法作为检测发酵液中纳他霉素含量的方法。检测波长：303nm；流动相：甲醇：水：冰乙酸体积比为70：30：2，流速：1.00 mL/min线性回归方程为Y=12500X+12600，R<2>=0.9995 精密度试验结果：平均RSD为0.753％。当信噪比为3时的最小检测限为31ng。 利用琼脂块法对S. natalensis进行提取，选择了发酵性能较好的SY-4号菌株作为诱变出发菌株，摇瓶产量为1.21g/L。 根据纳他霉素的生物合成途径和代谢调节机理，利用硫酸二乙酯进行化学诱变，分别以硫酸链霉素、纳他霉素和丙酸钠作为抗性筛选剂，获得抗性突变株SY-479，其纳他霉素产量达到1.64g/L。对SY-479进行原生质体紫外线诱变，经硫酸链霉素、纳他霉素和丙酸钠抗性筛选，最终获得纳他霉素高产菌株SY-4795，其摇瓶发酵产量达2.24g/L，较出发菌株生产能力提高147％。 摇瓶发酵结果显示，种子质量对纳他霉素合成具有明显的影响。在孢子培养时间7d、斜面冷藏时间60d以内、接种孢子浓度10<8>个/mL、种龄32h、接种量2％的条件下，纳他霉素的产量达到最大值，在2.01～2.12 g/L之间。 通过响应面分析，得出摇瓶发酵培养基最佳配方为：葡萄糖41.02g/L、大豆蛋白胨21.09g/L、酵母浸粉4.46g/L、丙酸钠1.89g/L。初始pH值7.5；接种量2％，发酵温度29℃，摇床转速200r/min，发酵120h，发酵产量在2.51～2.68g/L之间。 通过对7 L自动罐分批发酵代谢过程的分析，确定间歇补料分批发酵的流加工艺为：初始葡萄糖浓度40g/L，当其降至20g/L时开始补加50％葡萄糖，平均每隔6h补糖一次，葡糖糖的流加量控制在能维持发酵液糖浓度在20g/L左右，在整个发酵过程中，葡萄糖总流加量为40g/L。最终纳他霉素的产量提高到5.02g/L，比分批发酵提高了66.78％。 控制pH值的7L自动罐间歇补料分批发酵研究结果显示，流加2mol/L的NaOH，将发酵液pH值控制在5.3～5.4范围内，直到发酵结束，使纳他霉素产量提高到5.32g/L。 采用固液分离甲醇提取法对发酵液中的纳他霉素进行分离提取，确定固相分离工艺为离心速度10000 r/min、离心时间20 min，使固相中纳他霉素浓度达到7.72％，占纳他霉素总量96.18％，实现了发酵液中的固液分离。纳他霉素粗提工艺：用甲醇做提取剂，固液比1：4、混合溶液pH值调到9.5、提取3次。在此提取工艺下得到纳他霉素的纯度为84.13％，回收率87.46％。 大孔树脂浸泡脱色工艺：大孔树脂0.5％、温度40℃、时间30min、pH值6.5。脱色率达12.68％，检测纯度为91.20％，回收率82.12％。 分离提取工艺总回收率为71.87％。