壮药红根草化学成分研究

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目的:壮药红根草为唇形科(Lamiaceae)鼠尾草属(Salvia L)多年生草本植物黄埔鼠尾草Salvia prionitis Hance的干燥全草。目前对红根草化学成分及药理活性研究深度仍然不足,存在药效物质基础不明确的问题。本文对红根草的化学成分进行研究,通过一系列提取、分离方法得到单体化合物,应用理化、波谱技术鉴定其结构;并对部分化合物进行初步的抗炎、抗肿瘤活性筛选。希望研究结果能够为进一步发现红根草活性成分,提升红根草与相关制剂质量标准,以及充分利用药材资源提供科学依据。方法:1、干燥的红根草全草10 kg,破碎成粗粉,用50%乙醇热回流提取3次,回收溶剂,得到总提取物。用水分散后依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇反复萃取,得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位。采用D101大孔树脂、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、MCI树脂、ODS柱色谱、制备HPLC及重结晶等方法分离其成分,对得到的单体化合物采用理化检识、NMR、MS、IR、UV等方法进行结构鉴定。2、本研究以MTT法评价部分单体化合物对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞活力影响;以NO生成抑制率为指标,采用Griess法检测化合物对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞炎症因子的表达水平;采用MTT法进行肿瘤细胞增殖抑制活性测定。结果:1、从红根草中分离并鉴定了25个化合物,其中3个为二萜类化合物(1~3),12个为三萜类化合物(4~15)。化合物分别鉴定为脱氢松香烷(1)、柳杉酚(2)、泪杉醇(3)、狗脊蕨酸(4)、白桦脂酸(5)、白桦脂醇(6)、桦木酮酸(7)、齐墩果酸(8)、3-表齐墩果酸(9)、23-羟基齐墩果酸(10)、常春藤皂苷元(11)、3α,24-二羟基-12烯-28-齐墩果酸(12)、2α,3α,24-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(13)、熊果酸(14)、α-香树脂醇(15)、芹菜素(16)、原儿茶醛(17)、β-谷甾醇(18)、豆甾醇(19)、胡萝卜苷(20)、3-O-β-谷甾醇苷(21)、Patuletin-4’-methoxyl-7-O-β-D-glucopyrano-Side(22)、正十六烷酸(23)、正二十九烷(24)、反式-9-十八烯酸甲酯(25)。2、抗炎活性筛选结果:化合物8,14对NO生成抑制率达到60%以上,但存在一定的细胞毒性;化合物4~5,7,9~13对NO生成抑制率在25%~50%之间。抗肿瘤活性筛选结果:化合物8、13对人膀胱癌细胞(EJ)的IC50值低于顺铂;化合物8、11对人食管癌细胞(ECA-109)的IC50值分别为50.25μM、62.59μM;化合物8对人胰腺癌细胞(PANC-1)的IC50值低于顺铂。结论:从红根草植物分离得到的25个化合物,其中化合物4,7,10,14~16,19~22首次从红根草植物中分离得到。化合物8,14在一定程度上可以抑制LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞的炎症反应。化合物8、11、13对人膀胱癌细胞(EJ)、人食管癌细胞(ECA-109)具有一定的抑制作用;化合物8、10、11对人胰腺癌细胞(PANC-1)增殖抑制活性作用较好。
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