苷类物质对山羊乳腺上皮细胞增殖及酶蛋白基因表达的影响

来源 :扬州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ling0918
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本试验以组织块法分离培养,采用刮除法和相差消化法纯化传代获取山羊乳腺上皮细胞,以2~3代的细胞为对象,研究大豆苷、染料木苷、淫羊藿苷和桔梗总皂苷对其增殖和αsl和β两种酪蛋白基因表达的影响。   1山羊乳腺上皮细胞的培养及鉴定   运用组织块法分离培养山羊乳腺上皮细胞,经形态学和免疫组化鉴定为上皮细胞,采用刮除法和相差消化法纯化细胞,并用0.25%胰蛋白酶和0.04%EDTA进行传代,传代初始细胞活力保持良好,形态均一。传至20代,细胞活力下降。至25代,细胞开始凋亡。传至30代细胞发生完全凋亡。本章试验结果为山羊乳腺上皮细胞系的建立奠定了基础。   2苷类物质对山羊乳腺上皮细胞增殖的影响   采用MTT法研究了不同浓度的大豆苷、染料木苷、淫羊藿苷和桔梗总皂苷对山羊乳腺上皮细胞增殖的影响。结果表明:苷类纳克级别浓度组较微克级别浓度组对细胞增殖的影响更明显;处理细胞48h较24h和72h对细胞增殖的影响更明显;10ng/mL大豆苷显著促进山羊乳腺上皮细胞增殖;10ng/mL和100ng/mL染料木苷显著促进山羊乳腺上皮细胞增殖;山羊MEC增殖与淫羊藿苷纳克级别浓度有一定的剂量依赖性关系,而且所有浓度处理组(1、5、10、100和1000ng/mL)都能显著促进细胞增殖;说明这三种苷能促进细胞增殖。低浓度(1和5ng/mL)桔梗总皂苷能抑制细胞的增殖。   3苷类物质对山羊乳腺上皮细胞酪蛋白基因表达的影响   应用Real Time PCR测定不同浓度的四种苷处理细胞48h后对伍αsl和β两种酪蛋白基因相对表达量的影响。结果表明:低浓度(1ng/mL、10ng/mL)的大豆苷有所提高αsl-酪蛋白基因的表达,10ng/mL的大豆苷有所提高β-酪蛋白基因的表达;10ng/mL和100ng/mL的染料木苷显著提高αsl-酪蛋白基因的表达,1和10ng/mL的染料木苷能显著提高β-酪蛋白基因的表达量,10ng/mL染料木苷是提高酪蛋白基因表达的最优浓度;1ng/mL、10ng/mL和100ng/mL三种浓度的淫羊藿苷都能提高αsl-酪蛋白和β-酪蛋白基因的表达,随着浓度的提高,促进作用更明显,即有剂量依赖性;1和100ng/mL桔梗总皂苷提高细胞αsl-酪蛋白基因的表达,1和10ng/ml桔梗总皂苷提高β-酪蛋白基因的表达量,100ng/mL为提高αsl-酪蛋白基因表达的最佳浓度,10ng/mL为促进β-酪蛋白基因表达的最佳浓度。
其他文献
渗透数学思想方法的课堂讲习是一个持续的、漫长的过程,任重而道远,以上研究也仅仅是渗透数学思想方法教学里面的冰山一角.它的渗透需要所有一线教师的共同重视,在潜移默化里
随着这些年我国在国际上的地位不断提升,与他国合作交流的机会越来越多,综合人才的需求量变得越来越大,特别是对英语人才提出了更加严格的要求.所以,我国高中英语教师应该认
美术鉴赏教学是中学美术课程的一部分,旨在培养学生学科核心素养、综合素质和审美品质.所以,在实践教学中,教师除了完成教学任务以外,还应该采取科学的教学手段,积极开展美术
在棉铃形成最后的10~12天,棉铃各组分干重和内部营养物质含量的变化均较大,高强力纤维品系 PD9223的变化幅度明星大于低强力纤维品种徐州514。因此,在棉铃能够正常成熟吐絮的
在新课程的改革下,为了可以构建初中英语课堂的高效性,初中英语教师需要明确教学目标,处理好师生之间的关系,为学生创造一个良好的学习氛围.从而激发学生学习英语的热情,可以
改变课程内容,调整课堂模式,培养高尖端人才.具体来说:首先要建立起必修与选修相结合的课程结构;其次是注重理论与实践的结合,配合实用型人才;还有要注重国家统一性课程与地
培养道德与法治素养对一个人的一生都有特殊重要的意义,而初中时期是培养初中生道德与法治素养的关键时期.在这个重要的时期,家长教师应相互合作,对学生进行正确的引导.而学
想象画教学是以培养想象能力为主要目的的一种绘画教学方式。想象画教学经常采用无命题自由想象和有命题想像两种形式。无命题自由想象是指以想象训练为目的,不一定表现特定
直接饲喂微生物(Direct-fed microbials,DFMs)被认为是一个改善瘤胃微生态和提高反刍动物生产性能的潜在途径。直接饲喂微生物是将微生物制剂直接添加于饲料中,以改善消化和肠
家校合作作为一种最新的教师模式,它主要将家庭教育融合到学校教育中,这样可达到较高的教育质量.学生的思想品德、行为习惯容易受家庭教育的影响,家庭教育关系到学校教育能否