目的：(1)观察重组口服福氏宋内氏痢疾双价活疫苗免疫后的不良反应,为痢疾疫苗的推广应用提供依据。(2)研究受试者粪便中疫苗株的检出情况,为疫苗免疫效果提供依据。(3)对分离到的志贺菌进行毒力检测,评价疫苗株毒力变化情况。(4)对分离到的志贺菌进行同源性分析,探讨其与疫苗株和江苏省徐州地区野生株的同源性关系。 方法：(1)选择江苏省徐州市丰县地区,抽取80人口服祸氏宋内氏痢疾双价活疫苗,观察免疫后的各种不良反应。(2)采集受试者粪便标本或肛拭子,分离培养,观察、挑选可疑菌落进行生化鉴定(API20E板条)和血清试探性玻片凝集试验,挑选与疫苗株表型一致的志贺菌。(3)PCR方法检测毒力基因virG、ipaA、ipgB和mxiD,同时进行豚鼠角结膜试验对分离到的菌株进行毒力检测。(4)进行PCR扩增检测疫苗株FSW02 I相大质粒的特征性片断,脉冲场凝胶电泳方法对分离的菌株进行同源性分析。 结果：(1)80名受试者中总不良反应率为70.00％,其中全身不良反应发生率为3.75％,局部不良反应发生率为66.25％,各种不良反应中主要以腹痛和呕吐为主。(2)试验期间收集粪便标本或肛拭子共计1118份。分离培养、挑选可疑菌落穿刺克氏双糖铁培养基,挑选得到满足分解葡萄糖,不分解乳糖,产酸不产气的菌株共计347株。穿刺细菌微量生化管(尿素和蛋白胨水),保留尿素和蛋白胨水均为阴性的菌株共计121株。用API20E板条(bioMerieuex)对其进行生化鉴定,属于志贺菌属的共10株。(3)10株志贺菌的四个毒力基因virG、ipaA、ipgB和mxiD的PCR检测结果显示,其中两株菌四种毒力基因的检测均为阴性,其余菌株四种毒力基因的检测则呈阳性,豚鼠角结膜试验结果与PCR检测结果一致。(4)对分离到的菌株进行PCR扩增未检测出疫苗株FSW02 I相大质粒的特征性片断。脉冲场凝胶电泳检测显示,分离得到的忐贺菌和江苏省徐州地区野生株带型的聚类相似性为85％,属于同一个克隆系,而与疫苗株之间的聚类相似性为70％,可以认为这些菌株与疫苗株不属于同一个克隆系。 结论：(1)本次研究中重组口服福氏宋内氏痢疾双价活疫苗的各种不良反应发生率均高于同类研究中关于不良反应的报道,表明该疫苗的安全性还有待于进一步提高。(2)80名受试者为期16天的采样中共分离的10株志贺菌。毒力基因virG、ipaA、ipgB和mxiD的PCR检测结果与豚鼠角膜结膜实验结果一致,其中8株菌有毒力,推测疫苗株返祖或受试者自然感染。(3)FSW02 I相大质粒的特征性片断均未在粪便样本中分离的志贺氏菌中检出,因此还不能认为这几株菌为疫苗株的突变株。(4)对受试者粪便样本中分离的志贺氏菌及2007年江苏徐州地区志贺菌野生株进行脉冲场凝胶电泳分型,结果从受试者粪便中分离出的志贺菌和徐州沛县地区腹泻者粪便中分离的志贺菌野生株拥有相同的PFGE型别,说明受试者在服苗期间发生志贺菌感染。