研究背景:牙,是人体最坚硬的器官,它由硬组织釉质、牙本质、牙骨质以及唯一的软组织牙髓组织组成,其中牙本质是构成牙体组织的主体结构。当釉质受损,其下层的牙本质暴露,内部的成牙本质细胞会受到刺激,因此而变性甚至坏死,此时牙髓深层的未分化的间充质细胞,即为牙髓干细胞（dental pulp stem cells,DPSCs）,可移至此处分化形成成牙本质细胞,分泌产生牙本质基质,继而矿化形成第三期牙本质,即所谓的修复性牙本质。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）是一组重要的蛋白水解酶,因其需要Ca²⁺、Zn²⁺等金属离子作为辅助因子而得名,其家族成员结构相似,基质金属蛋白酶主要分为五大类,其中明胶酶类包含有MMP-2及MMP-9,其作用底物主要为胶原蛋白Ⅳ、Ⅴ、Ⅸ、Ⅹ及变性胶原蛋白。实验研究表明,在人乳恒牙冠部牙本质中,均含有不等量的MMP-2、MMP-8、MMP-9,乳牙冠部牙本质中,MMP-2的含量最高,其次为MMP-8、MMP-9,而在恒牙牙本质中,钙化程度低的牙本质相较于钙化程度高的牙本质而言,有着更高含量的MMP-8。MMP-8能够分解牙本质中最主要的蛋白质—I型胶原蛋白,形成两条肽链,MMP-2、MMP-9可以将这两条肽链酶解成更短的肽链,并且,MMP-2分解牙本质蛋白-1（dentin matrix protein-1,DMP-1）所形成的产物能够促进牙髓干细胞向成牙本质细胞分化,而MMP-9也参与牙体形成和发育的早期阶段。因此,研究牙髓干细胞向成牙本质细胞分化的机制,对于牙体缺损甚至牙体缺失的治疗有着重要作用。目的:通过研究向成牙本质细胞方向分化时,DPSCs所分泌产生的MMP-2、9的量,探索DPSCs成牙本质分化的机制,进而为其在牙体缺损的治疗中提供帮助。方法:选用无龋坏的年轻恒牙,通过改良组织块酶消化法获取DPSCs初代细胞,培养传代至第4代DPSCs,用成牙本质（成骨）诱导液诱导使其向成牙本质方向分化,分别诱导1周、2周、3周、4周后行检测其碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP/ALP）活性及牙本质涎磷蛋白（dentin Siaphoprotein,DSPP）的含量来鉴定其成牙本质方向的分化能力及分化程度,并使用酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）技术定量检测MMP-2、9的含量。结果:成功培养出DPSCs。用成牙本质诱导液培养的DPSCs,可使其产生矿化结节,并且ALP活性及DPSS含量较对照组明显升高,表明其向成牙本质（骨）分化。前3周中,实验组MMP-2的含量较对照组无明显差别,当培养至第4周时,MMP-2的含量明显高于对照组,而整个过程中,MMP-9的含量始终明显低于对照组。结论:MMP-9在DPSCs成牙本质期分泌降低,而MMP-2呈上升趋势。