基于iTRAQ的蛋白质组学对胰腺癌血清标志物筛选与验证的临床研究

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目的 鉴定并且验证用于胰腺癌早期诊断的血清生物标志物,以期提高胰腺癌的早期诊断率,改善胰腺癌患者的预后。方法(1)使用iTRAQ(同位素标记相对与绝对定量技术)联合LC-MS/MS(液相串联质谱)测定在胰腺癌患者(PC)与健康人群(HC)血清中差异表达的蛋白,并进行生物信息学分析。(2)使用ELISA(酶联免疫吸附试验)法测定差异表达蛋白在血清中的水平,并使用ROC(受试者工作特征曲线)比较目标蛋白诊断胰腺癌的效能,选取效能优于CA19-9的蛋白及CA19-9进一步研究。(3)ELISA法测定上述蛋白及CA19-9在血清中的表达水平,并使用ROC评价其单独或联合诊断早期胰腺癌的效能,使用NRI(净重新分类指数)比较蛋白组合与CA19-9在胰腺癌早期诊断上的效能。结果(1)第一组标本中,共鉴定出蛋白869个,其中在胰腺癌患者与健康人群血清中差异表达的有55个,在胰腺癌患者血清中高表达的18个,低表达的37个。(2)第二组标本中,PROZ(维生素K依赖蛋白Z)、TNFRSF6B(肿瘤坏死因子受体超家族成员6B)和CA19-9在胰腺癌患者血清中的水平明显高于健康人群和胰腺良性肿瘤患者(pancreatic benign tumor control,BC),并具有统计学意义(P<0.01)。在各自的ROC曲线中,PROZ和TNFRSF6B的AUC(area under curve,曲线下面积)高于CA19-9,并具有统计学意义(P<0.05)。PROZ联合TNFRSF6B的AUC高于单独使用TNFRSF6B,并具有统计学意义(P=0.0026)。(3)第三、第四组标本中,在鉴别Ⅰ期胰腺癌患者与胰腺良性肿瘤患者和健康人群时,使用PROZ、TNFRSF6B和CA19-9组合的AUC均高于PROZ、TNFRSF6B、CA19-9单独使用时的AUC(P<0.05)。(4)第四组标本中,PROZ、TNFRSF6B和CA19-9组合相对于单独使用CA19-9在鉴别Ⅰ期胰腺癌患者与胰腺良性肿瘤患者和健康人群时,其相加NRI为27.0,绝对 NRI 为 13.0%。结论 PROZ和TNFRSF6B是检测胰腺癌的新型血清生物标志物,联合使用PROZ、TNFRSF6B和CA19-9可以区分早期胰腺癌患者和胰腺良性肿瘤患者及健康人群。
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