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胃癌是一种常见的消化道恶性肿瘤,是我国当下重要的公共卫生问题。我国胃癌高发,到目前为止还没有实现全国性的胃癌筛查。外科手术是胃癌主要治疗方法,其中腹腔镜胃癌手术是应用最广泛的治疗胃癌的微创技术。多数胃癌患者在初次诊断时就已经是晚期,在手术治疗后常复发,患者5年生存率不超过30%,若使用准确有效的筛查手段进行胃癌的早期筛查,经过治疗后胃癌患者5年生存率将大于90%。因此寻找特异性胃癌诊断标志物,提高胃癌早期诊断率至关重要。RBM24(RNA-bindingmotif24)是RNA结合蛋白家族的成员,也是重要的剪接因子之一,主要是通过调控靶基因mRNA稳定性或可变剪接等调节靶基因的表达。本论文从TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中下载胃癌和癌旁组织的RNA-seq数据,并结合胃癌组织芯片分析RBM24蛋白在胃癌组织中的表达情况及RBM24蛋白与胃癌患者生存期的相关性,通过检测RBM24对SGC-7901胃癌细胞的表型的影响,以及对过表达RBM24基因的SGC-7901胃癌细胞进行RNA-seq测序,寻找与RBM24相互作用的靶分子,初步研究RBM24在胃癌发展中的作用机制。首先使用Perl语言对TCGA数据库中胃癌及癌旁组织的RNA-seq数据,进行提取、整合、ID变换,并使用R语言分析RBM24在胃癌及癌旁组织中的表达情况。同时在胃癌组织芯片中进行RBM24蛋白的免疫组化,分析RBM24蛋白在细胞核和细胞质中的表达情况,以及RBM24蛋白与胃癌患者生存期相关性。构建过表达RBM24的慢病毒载体,包装为慢病毒后感染SGC-7901胃癌细胞,通过细胞增殖、细胞划痕、transwell以及检测肿瘤迁移相关蛋白等实验,研究RBM24对胃癌细胞SGC-7901表型的影响。对过表达RBM24基因的SGC-7901细胞RNA-seq的结果进行生物信息学分析,使用Ensembl在线网站和PCR实验进行差异剪接基因转录本的验证,对差异基因中可能与RBM24结合的候选靶基因进行初步探究。在TCGA数据库中下载胃癌和癌旁组织样本的数据共407个,其中胃癌组织样本375个,癌旁组织样本32个。综合前期对TCGA数据库分析的结果,使用R语言分析胃癌组织中RBM24的表达情况,发现RBM24 mRNA在胃癌组织中表达下调。在胃癌组织芯片中进行免疫组化实验,发现RBM24蛋白在胃癌组织胞浆中上调表达趋势,在胞核中下调表达趋势。在SGC-7901细胞中过表达RBM24基因,通过细胞增殖实验、划痕愈合实验和transwell实验进行表型检测,结果显示过表达RBM24后,其增殖能力、划痕愈合能力和迁移能力均降低,E-钙粘蛋白(E-Cadherin,E-cad)表达上调。SGC-7901细胞过表达RBM24基因的RNA-seq测序结果中,共有44个差异表达基因,其中SERPINB5、EGR1、SERF1A基因上调表达,并在3’UTR区域存在RBM24的结合位点。利用qPCR和Western Blot方法验证RNA-seq测序结果,发现SERPINB5在RNA和蛋白水平上均过表达。综上所述,分析TCGA数据,RBM24 mRNA在胃癌组织中下调表达,RBM24蛋白在胃癌组织胞浆中上调表达,胞核中下调表达,与TCGA数据库分析结果基本一致。过表达RBM24可以降低SGC-7901胃癌细胞的细胞增殖能力、划痕愈合能力和迁移能力,并且E-cad蛋白表达上调,提示RBM24可能在胃癌发展方面发挥作用。同时对过表达RBM24的胃癌细胞mRNA表达谱进行分析及验证,发现RBM24过表达可促进SERPINB5基因上调表达,提示SERPINB5基因可能作为RBM24的下游靶基因发挥作用。本研究为揭示胃癌中RBM24的作用机制提供了新的研究方向,为胃癌的早期诊断、预后判断和治疗提供了新思路。