信号转导和转录激活因子(Signal transducer and activator of transcription/STAT)1在人类和哺乳动物Janus kinase(JAK)-STAT信号转导中起重要作用,STAT1在被活化的JAK1磷酸化后,会发生二聚化进而入核行使功能。青鱼生长速度快,肉质好,在我国养殖的经济鱼中占有很大的比重;在青鱼养殖过程中,幼鱼期易受到外界病原微生物感染一直是困扰青鱼养殖业的难题。天然免疫是宿主细胞抵御外界病原微生物入侵的第一道防线,因此研究青鱼天然免疫抗病机制将促进这一问题的解决。本文以青鱼天然免疫相关因子STAT1作为研究对象,克隆并鉴定了两种青鱼STAT1同源基因(bcSTAT1a和bcSTAT1b),bcSTAT1a和bcSTAT1b的CDS分别包括2400个和2157个核苷酸,分别由800个和719个氨基酸组成,其蛋白等电点分别为5.65和5.58。在qPCR实验中,我们发现在ploy(I:C)、脂多糖(LPS)、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)和干扰素(Interforen/IFN)的刺激下,宿主细胞(MPK)中bcSTAT1a和bcSTAT1b的转录水平均明显升高,但通过对比我们发现在不同种外物的刺激下的bcSTAT1b转录水平明显比bcSTAT1a高。在免疫荧光和免疫印迹实验中,我们发现bcSTAT1a与bcSTAT1b在胞质和细胞核中都有表达,且bcSTAT1a和bcSTAT1b蛋白大小分别约为95KDa和82KDa。通过免疫沉淀(co-IP)法检测bcSTAT1a与bcSTAT1a、bcSTAT1b与bcSTAT1b、bcSTAT1a与bcSTAT1b存在相互作用关系,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)数据显示,bcSTAT1a和bcSTAT1b可能在体内形成同/异源二聚体,类似于哺乳动物。在双荧光报告系统中,转染了bcSTAT1a和bcSTAT1b的EPC细胞中均表现出剂量依赖性的对斑马鱼干扰素启动子3(DrIFNφ3)和青鱼干扰素启动子(bcIFNα)诱导能力。噬斑实验结果表明,在EPC细胞中过表达bcSTAT1a和bcSTAT1b与对照组相比均表现出针对GCRV的抗病毒活性。从以上的数据显示,bcSTAT1a和bcSTAT1b在GCRV启动的宿主抗病毒先天免疫激活反应中扮演着重要的作用。