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目的观察细胞因子体外培养扩增CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell, Treg)的作用,以便体外获取大量Treg细胞。方法将从C57BL/6幼稚(na?ve)小鼠脾脏和淋巴结中提取的Treg以羟基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidylester,CFSE)标记,并与从DBA/2小鼠骨髓中提取的成熟树突细胞(mature dendritic cell, mDC)混合培养于96孔圆底培养板中(Treg 1×105/孔,mDC 2.5×104/孔)。实验共分为4组:对照组不加入任何细胞因子,白细胞介素-2(IL-2)组每孔加入IL-2(20ng/ml),白细胞介素-4(IL-4)组每孔加入IL-4(20ng/ml),白细胞介素-15(IL-15)组每孔加入IL-15(150ng/ml)。6天后通过流式细胞仪检测Treg增殖和凋亡的情况。分别将培养获得的Treg与经CFSE标记的C57BL/6幼稚小鼠效应性T细胞(effector T cell, Teff)混合培养,6天后以流式细胞仪测定扩增后的Treg对Teff的抑制活性。通过流式细胞仪检测扩增后Treg的Foxp3表达,从而证明培养获得的Treg仍保持其表型。结果在保持其对Teff抑制活性的同时,IL-2组、IL-4组、IL-15组Treg的增殖细胞前体频率(precursor frequency PF,代表发生分裂增殖的细胞占原代细胞的百分比)分别为31.3%、28.9%、34.5%,明显高于对照组(14.5%),P<0.05;增殖指数(proliferation index PI,代表增殖后细胞总数与原代细胞总数的比值)分别为1.9、1.7、1.8,明显高于对照组(1.5),P<0.05。IL-2组、IL-4组、IL-15组Treg的凋亡细胞比例分别为12.8%、11%、12.7%,明显低于对照组(28.9%),P<0.05。扩增后的Treg仍高表达Foxp3(91.75%)。结论IL-4、IL-15和IL-2一样,具有促进Treg增殖、减少其凋亡的作用,并同时保持对Teff的抑制功能。扩增后的Treg仍保持其表型,高表达Foxp3。