破布木扦插繁殖技术及生根机理研究

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破布木(Cordia dichotoma Forst.f.),为紫草科破布木属多年生落叶乔木,果实能食且可入药,具有较高的经济、生态价值,我国部分沿海地区将其作为经济林树种推广种植。扦插作为苗木营养繁殖培育技术之一,具有易操作、成苗快、繁殖系数大等优点。目前,破布木苗木繁育研究较少,相关扦插繁殖的系统研究还未见报道。本论文通过单因素和正交设计实验,建立了破布木扦插繁殖体系;在此研究基础上,对其插穗不定根形成过程中营养物质、内源激素与氧化酶活性等生理生化指标的变化进行研究,并采用i TRAQ技术对其生根过程中的相关差异蛋白进行了相关分析,初步揭示了破布木插穗生根机理。得出的研究结论如下:(1)破布木扦插繁殖最优组合为:用当年生木质化硬枝为插穗,V珍珠岩:V泥炭=2:1为扦插基质,使用4000 mg·L-1IBA浸泡插穗基部15 s,在春季进行扦插,其成活率高达94.44%。(2)破布木插穗不定根形成大致可分为为愈伤组织形成期(S1,0-20 d)、不定根形成期(S2,20-40 d)、不定根伸长期(S3,40 d以后)3个阶段;插穗生根有皮部生根、愈伤组织生根和混合生根3种类型,其中以愈伤组织生根型为主。IBA处理,可以加快破布木插穗生根进程,并增加愈伤组织生根型插穗的形成。(3)IBA处理可以促进不定根形成期可溶性糖和淀粉的代谢合成,刺激不定根形成前期可溶性蛋白的积累,提高不定根伸长期能源物质的利用效率,利于生根。PPO、POD与插穗生根关系密切,IBA处理显著提高了PPO、POD的活性,有利生根;IBA处理提高了愈伤组织形成期SOD活性,利于插穗切口愈合及后期不定根的发生;CAT活性在IBA处理下受到抑制,细胞的毒害作用减弱,利于生根。IBA处理增加了插穗IAA含量,利于诱导不定根的形成,ABA含量变化与生根呈负效应,IBA处理抑制了ABA的生成,减少了ABA对插穗活性的影响,促进不定根的形成。GA3与ZR含量表现为前期相对低浓度利于愈伤组织形成,后期相对高浓度利于不定根的发生。(4)利用i TRAQ技术对插穗S1、S2、S3三个不同时期差异蛋白组学研究,共得到与生根相关的蛋白2647个,其中可信蛋白为343个。不定根形成前期(S1 VS S2),共筛选出差异蛋白182个,其中上调蛋白133个,下调蛋白49个;不定根形成后期(S2 VS S3),共鉴定出差异蛋白217个,其中上调蛋白167个,下调蛋白50个。(5)GO富集分析结果表明差异蛋白主要富集在类囊体、光合膜、核糖体、光系统等细胞组成中,参与光合作用、细胞大分子合成与肽生物合成等细胞代谢过程;KEGG Pathway富集分析,差异蛋白主要富集于光合作用、核糖体代谢与DNA复制等通路中。
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