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本文以中药黄芩为原料,利用黄芩中的内源酶——黄芩苷酶(β-D-葡萄糖苷酸酶)水解转化黄芩苷和汉黄芩苷,通过建立一级反应动力学模型考察负压空化系统对水解效率的影响,并筛选出最佳内源酶水解工艺条件;以水解产物黄芩素和汉黄芩素的提取率为考察指标,建立传质动力学模型考察负压空化系统对提取效率的影响,并优化筛选出最佳负压空化提取的工艺条件;将以上所得提取物通过液液萃取、低压制备硅胶柱层析和重结晶等技术手段对目标产物黄芩素和汉黄芩素进行分离纯化研究,最终建立了一整套黄芩中内源酶水解制备并分离纯化黄芩素和汉黄芩素的最佳工艺,为合理有效的利用黄芩资源提供了科学依据。1.建立了检测黄芩中四种主要黄酮类成分的HPLC分析方法色谱条件:液相:Agilent1100高效液相色谱仪;色谱柱:Agilent Eclipse HiQ SilC18柱(250mm×4.6mm i.d.,5μm)以及色谱柱的保护柱(10mm×4.0mm i.d.,5μm);柱温:30℃;检测波长:276nm;流动相:0.05%甲酸水溶液(A)-乙睛(B);洗脱梯度:0-3min20%(B),3-15min20-45%(B),15-20min45-60%(B),20-23min60%(B);进样量:10μL:流速:1mL/min。2.确定了内源酶催化水解黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的工艺条件利用负压空化强化内源酶催化水解黄芩苷和汉黄芩苷,通过一级反应动力学模型考察负压空化系统对对内源酶水解效率的影响并确定最佳水解工艺条件:真空度:-0.08MPa液固比:20:1mL/g最适温度:50℃水解时间:60min最适pH:5在上述优化的条件下,负压空化强化内源酶催化水解的转化速率提高了三倍,黄芩苷和汉黄芩苷的转化率分别可达98.213%和96.599%,水解产物黄芩素的含量从17.974mg/g增加到98.255mg/g,提高了4.47倍;汉黄芩素的含量从6.047mg/g增加到23.286mg/g,提高了2.85倍。3.确定了负压空化提取水解产物黄芩素和汉黄芩素的最佳工艺条件利用负压空化提取水解产物黄芩素和汉黄芩素,通过传质动力学模型考察负压空化系统对提取效率的影响并确定最佳提取工艺条件:提取溶剂:80%乙醇水溶液真空度:-0.08MPa液固比:20:1mL/g提取次数:3次在以上优化条件下,黄芩素和汉黄芩素在短时间内的提取率分别可达98.255mg/g和23.286mg/g,且传质动力学结果表明负压空化可通过加快传质提高提取效率。4.通过液液萃取、低压制备液相色谱分离、低温析晶和重结晶技术对水解样品中的黄芩素和汉黄芩素分离纯化,最终得到黄芩素和汉黄芩素晶体,黄芩素的最终得率为59mg/g,纯度为98%,汉黄芩素的最终得率为14mg/g,纯度为98%。