【摘 要】
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凡纳滨对虾是中国重要的养殖虾类之一,随着养殖业的快速发展,因病毒和细菌等引发的病害日趋严重,对其造成重大经济损失;由革兰氏阴性菌弧菌属引起的弧菌病对对虾养殖造成的危害和损失巨大,仅次于病毒病,目前解决弧菌病的方法还有待发掘,特别是病原体的研究,更是解决病害的难点。渔药的滥用使细菌产生耐药性,导致细菌病很难治愈。脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分,本试验选用LPS为研究对象,探寻LPS与
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凡纳滨对虾是中国重要的养殖虾类之一,随着养殖业的快速发展,因病毒和细菌等引发的病害日趋严重,对其造成重大经济损失;由革兰氏阴性菌弧菌属引起的弧菌病对对虾养殖造成的危害和损失巨大,仅次于病毒病,目前解决弧菌病的方法还有待发掘,特别是病原体的研究,更是解决病害的难点。渔药的滥用使细菌产生耐药性,导致细菌病很难治愈。脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分,本试验选用LPS为研究对象,探寻LPS与凡纳滨对虾先天性免疫的相关性。本实验对凡纳滨对虾分别进行LPS和生理盐水注射,采取了空白组,注射后3、6、12、24、48小时的血淋巴和肝胰腺。对血浆免疫指标AST,ALT和ALP的活性进行检测,发现注射LPS后的12h内,AST,ALT活性降低,ALP活性基本不变,12h后AST,ALT和ALP活性明显升高,说明注射LPS可能首先激活了对虾的先天性免疫来抑制相关酶活性。对肝胰腺组织进行HE染色,发现注射生理盐水3h后肝小管上皮细胞溶解和坏死,而LPS注射组12h后首次发现溶解和坏死,进一步说明注射LPS会激活对虾的先天性免疫,维持肝胰腺正常的结构和功能,缓解肝胰腺损伤,注射生理盐水不能激活对虾的先天性免疫,从而引起肝胰腺损伤。对UPR通路相关基因研究发现注射LPS后肝胰腺GRP78,ATF6,IRE1和PERK基因表达被抑制,在血细胞中,四个基因的表达量升高,说明血细胞中UPR反应较强,注射LPS可引起虾的内质网应激,虾通过激活UPR通路来抑制内质网应激,进而恢复其功能;ALF相关基因研究发现注射LPS后ALFA在肝胰腺和血细胞中表达被抑制,ALFB在肝胰腺中表达被抑制,在血细胞中表达量升高,ALFC在肝胰腺和血细胞中表达量均升高,表明ALFC具有较强的抗脂多糖活性,ALFB活性较差,而ALFA活性最差。本试验对脂多糖的毒理作用从分子水平进行了分析,可为革兰氏阴性菌引起的凡纳滨对虾细菌病研究提供理论基础。
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