论文部分内容阅读
我国有着较为丰富的鱼类资源，但是由于许多加工淡水鱼的企业规模小，对淡水鱼的加工能力有限，使得加工过程中产生的大量下脚料，如鱼鳞、鱼骨、鱼内脏等很难得到合理利用，不仅浪费了资源而且污染了生态环境。鱼鳞中含有丰富的胶原蛋白，可以通过进一步加工制成胶原蛋白肽，提升其附加值。本文以鲤鱼鱼鳞为研究对象，研究蛋白酶种类、酶解条件对鲤鱼鱼鳞水解效果的影响，并对肽含量和分子量分布进行分析，为避免鱼鳞资源的浪费工业生产胶原蛋白肽奠定基础。（1）通过L416(4)正交实验，分别研究了胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶水解的料液比、酶浓度、温度和时间对水解度以及多肽含量的影响。结果表明，胃蛋白酶水解的最佳反应条件是液料比为100mg/mL、温度为55℃、加酶量为40mg/mL、时间为3.5h，胶原蛋白的水解度为23.26%，多肽含量为125.50mg/g。中性蛋白酶水解最佳反应条件是液料比为100mg/mL、温度为55℃、加酶量为40mg/mL、时间为4.5h，胶原蛋白的水解度为31.54%，多肽含量为137.49mg/g。木瓜蛋白酶水解最佳反应体系是液料比为100mg/mL、温度为65℃、加酶量为20mg/mL、时间为4.5h，胶原蛋白水解度为26.13%，多肽含量为132.22mg/g。（2）通过胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶的组合酶解实验，研究了不同酶组合对水解度及多肽含量的影响。结果表明，先加胃蛋白酶再加木瓜蛋白酶最后加中性蛋白酶的组合最好，胶原蛋白的水解度为55.74%，多肽含量为164.67mg/g。（3）用三个酶组合水解的最佳反应体系进行鲤鱼鱼鳞的水解，将水解产物分别用Sephadex G-15凝胶过滤层析柱和Tricine-SDS-PAGE两种方法进行分子量分布的测定。结果表明，通过Sephadex G-15凝胶过滤层析柱分析得到的分子量分布为5700Da以上的多肽占70%；5700-660Da的多肽占17.5%；分子量为660Da以下的多肽占12.5%。通过Tricine-SDS-PAGE分析得到的分子量分布为1730Da左右的多肽占10.5%，分子量660Da以下的占9.5%。二者的分子量分布范围有差异。