目的基于前期对甘草泻心汤不同剂量对肠道菌群及肠道中s Ig A表达调节作用的研究,本次实验研究采用过量抗生素灌胃的方法,制备小鼠肠道菌群失调的动物模型,进一步研究甘草泻心汤对肠道菌群多样性的影响。然后利用16Sr DNA扩增子测序的方法检测给予甘草泻心汤治疗14日后的小鼠肠道菌群多样性的改变,初步探求甘草泻心汤对肠道菌群多样性的影响机制,为临床应用提供科学依据。方法把购回的72只清洁级昆明小鼠随机分成6个小组,即正常小鼠组、模型小鼠组、甘草泻心汤高、中、低剂量治疗组以及西药治疗组,每组12只实验小鼠。除正常组给予同等剂量生理盐水进行灌胃以外,其它5组都采用盐酸林可霉素灌胃进行造模,连续灌胃给药7天,小鼠粪便稀湿即可。造模成功后,模型组小鼠灌胃方式自动改为等量的生理盐水,中药各组分别给予相应剂量的甘草泻心汤灌胃,西药组给予等同于中药组剂量的双岐杆菌四联活菌片(思连康)灌胃,正常组灌胃方式不变,治疗共计14天。治疗结束后,无菌操作情况下收集断颈处死后的小鼠回肠段内容物,运用相关DNA提取试剂盒提取肠道内容物基因组DNA,用细菌16S特异引物对肠道内容物基因组样本的16Sr DNA特定区域进行PCR扩增后进行上机测序,采用相关统计分析,观察和比较给予甘草泻心汤不同剂量治疗后小鼠肠道菌群多样性的变化。结果1.双歧杆菌:甘草泻心汤中剂量组双歧杆菌OTUs序列数目明显高于模型组,且高于高剂量组、低剂量组及思连康组,即物种丰度高于高剂量组、低剂量组及思连康组。2.乳酸杆菌:甘草泻心汤中剂量组乳酸杆菌OTUs序列数目明显高于模型组,且高于高剂量组、低剂量组及思连康组,即物种丰度高于高剂量组、低剂量组及思连康组。3.正常组物种相对丰度>甘草泻心汤中剂量组物种相对丰度>思连康组物种相对丰度>甘草泻心汤高剂量组物种相对丰度=甘草泻心汤低剂量组物种相对丰度>模型组物种相对丰度。4.样本内多样性分析中,正常组Shannon指数>甘草泻心汤中剂量组Shannon指数>高剂量组Shannon指数>低剂量组Shannon指数>思连康组Shannon指数>模型组Shannon指数。5.Beta多样性分析中,与正常组相比较,甘草泻心汤高剂量组相异指数为0.141;中剂量组相异指数为0.118;低剂量组相异指数为0.129;思连康组为0.172;模型组为0.291。结论1.对于肠道内共生菌如双歧杆菌、乳酸杆菌的调节,甘草泻心汤高、中、低剂量组及思连康组均有一定的改善作用,其中甘草泻心汤中剂量组调节作用优于高、低剂量组及思连康组。2.甘草泻心汤高、中、低剂量组及思连康组对肠道菌群多样性均有改善作用,其中甘草泻心汤中剂量组对菌群多样性的调节作用明显优于高、低剂量组及思连康组。