动物组织中莱克多巴胺残留免疫检测方法研究

来源 :天津科技大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:wuwuwujduuez
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文以butane-1,4-diol diglycidyl ether作为连接臂,采用直接偶联法,将半抗原莱克多巴胺与载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)偶联作为免疫抗原RAC-BSA进行动物免疫,与辢根过氧化物酶(HRP)偶联得酶标抗原RAC-HRP,作为直接竞争酶联免疫的酶标记物;采用琥珀酸酐-混合酸酐法合成RAC-OVA,作为间接竞争的包被抗原进行抗血清效价测定。通过特定的免疫程序,免疫日本大耳白兔,获得了亲合性很高的抗莱克多巴胺的抗血清,经免疫亲和层析法纯化后获得多克隆抗体,建立直接竞争酶联免疫检测方法。结果表明,此方法具有较高的灵敏度,IC50为0.9ng/mL,检出限(IC15)为0.15 ng/mL;除了与多巴酚丁胺的交叉反应为7.5%外,与克伦特罗、沙丁胺醇、特步他林、异丙肾上腺素、和异奎胍均无交叉现象,说明抗体特异性较高。选择四种动物样品进行基质影响消除的研究,结果表明,采用PBS进行5倍提取后,便可消除基质影响,不需要有机溶剂和其他净化步骤,样品中的检出限达0.5μg/kg;在样品中添加三个水平的莱克多巴胺浓度,回收率达60%以上,为莱克多巴胺快速检测试剂盒的研制奠定了物质基础。为开发快速检测试剂盒,论文进一步验证了抗体和酶标抗原稳定性及贮存条件。研究表明,抗体和酶标在4℃条件下储存半年以上而不影响检测性能,有利于莱克多巴胺试剂盒的推广和应用,从而实现对莱克多巴胺的有效监控。在建立了莱克多巴胺酶联免疫检测方法的基础上,还研究建立了莱克多巴胺化学发光酶免疫分析方法,对实现莱克多巴胺的高灵敏度、快速检测具有重要意义。
其他文献
饮水型砷暴露是一个居民暴露于含砷饮水尤其高砷饮水而导致的健康状况受损的世界性问题。它普遍存在于世界各地并诱发各种疾病,对人体健康,社会生活及经济生活等多个方面造成
为进一步加强高等学校教学工作的宏观管理和指导,努力提高高校规模扩大后人才培养的质量,提升我国高等教育的综合实力和国际竞争力,2003年教育部决定建立5年一轮的全国高等学
摘要兴趣是鼓舞和推动学生学习的巨大动力。每个中学语文教师都必须研究并掌握激发学生学习兴趣的方法,即要让学生明白为什么学;要与学生进行广泛的感情交流;要创设愉快的课堂学习气氛;要开展生动有趣而形式多样的课外活动;要创造条件让学生不断体验成功的快乐,用表扬、鼓励等手段强化学生的学习积极性,从而形式良好的心理定势。  关键词语文教学 兴趣培养  中图分类号:G633.3文献标识码:A    语文兴趣方法
摘要 当前,大学英语教学改革成了我国高等教育改革的热门话题。本文分析了我国大学英语教学现状及存在的问题,并对其提出了一些可行的改革思路及对策。  关键词 大学英语教学 教学改革  中图分类号:G420 文献标识码:A    1 导言    自改革开放以来,我国的大学英语教学就一直都被全社会广泛关注,甚至,大学英语教学水平在一定程度上被当作衡量一所大学教学质量的重要指标。现如今,各国间的交流与合作日
摘 要 随着西方文化的不断渗透,大学生思想政治工作面临着越来越大的冲击和挑战。而体育学子特有的勇于奉献、坚韧、进取等性格品质也决定了增强学生团队精神,将成为加强和改进体育院校大学生思想政治工作的新途径。  关键词 团队精神 体育院校 大学生思想政治工作  中图分类号:G641 文献标识码:A    国际21世纪教育委员会于1996年向联合国教科文组织提交的《教育—财富蕴藏其中》报告中指出:为了实现
学校管理的宗旨在于提供优质服务什么是学校管理?有人认为是决策,有人认为是执行,有人认为是控制,也有人认为是领导,这些都有一定的合理性,但笔者认为,学校管理本身不是目的
最近,能源部发出了“关于华中电管局所属电厂与义马矿务局经济纠纷的处理意见通知”。至此,一场历时三年之久、电厂两年拒付义马煤款800多万元的经济纠纷案,以“电厂拒付煤
摘要 本文通过在高等职业教育专业课教学过程中引入几种教学方法,包括理论课和实验课教学方法的改革;在专业课教学中融入素质教育;提高教师教学水平等几方面探索提高高等职业教育水平的方法。  关键词 高等职业教育 教改  中图分类号:G420 文献标识码:A    高等职业教育是近十多年来我国高等教育发展的一个崭新的亮点,据不完全统计,“2002年全国承担高职教育的学校已达1214所,占高校总数的66.9
一所学校对学生的影响主要是通过课程实现的,课程决定着学生在学校能否获得实质性的发展。但现在一些校长把太多的精力放在了疏离于课程的人、财、物、时间、空间、信息的管
摘要做好文言文试题不仅需要有阅读文言文功底,还要讲究解答方法,才有可能在有限的考试时间内获得最佳的效果。本文是作者结合多年的教学经验和考生在考试中实战经验的总结,希望能对学习者和参考者有所帮助。  关键词积累 语感 语境 思索 全面 准确  中图分类号:G633.3文献标识码:A    高考语文试题中的阅读理解是一种常见的题型,也是分值不低的涉考内容,其中文言文阅读也是其中重要内容之一,其考题的内