转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3在肝癌患者外周血中表达情况的研究

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目的:一、了解肝癌患者外周血中是否存在Treg优势化现象。二、研究肝癌患者外周血中Th1、Th2、Th17及Treg各自的主要转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3的表达情况。材料与方法:抽取实验组20例肝癌患者与对照组20例健康志愿者的外周静脉血,采用流式细胞术检测外周静脉血单个核细胞中CD4~+CD25~+T细胞占CD4+细胞比例;采用荧光定量PCR法检测外周静脉血单个核细胞中Th1、Th2、Th17及Treg各自的主要特异转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3的mRNA表达情况。结果:原发性肝癌组外周血单个核细胞中CD4~+CD25~+Treg占CD4+T细胞比例要显著高于对照组(17.72±4.97 VS 9.22±2.68, P<0.01),Treg的特异转录因子FOXP3 mRNA的表达肝癌组明显高于对照组(3.17±1.59 VS 1.39±1.13, P<0.01),斯皮尔曼相关性分析显示FOXP3 mRNA表达与CD4~+CD25~+Treg细胞量呈正相关(肝癌组r=0.761, P<0.01)。Th1的特异转录因子T-bet mRNA的表达肝癌组显著低于对照组(52.34±34.07 VS 104.±56.00, P<0.01),而Th2的特异转录因子GATA-3 mRNA的表达则高于对照组(1.38±1.15 VS 0.58±0.65, P<0.05),T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值明显减小(86.01±116.71 VS 461.88±708.81, P<0.05)。Th17的特异转录因子RORgammat mRNA表达水平肝癌组较对照组明显升高(72.32±32.82 VS 33.07±22.86, P<0.01)。结论:1、原发性肝癌组外周血中CD4~+CD25~+Treg细胞明显增多及其特异转录因子FOXP3 mRNA表达水平明显升高,且两者呈正相关关系,说明原发性肝癌患者外周血呈现CD4~+CD25~+Treg细胞优势化现象,其肿瘤局部微环境中负性调节因素增加,将会有助于肿瘤的转移和复发。2、原发性肝癌患者外周血中Th1特异转录因子T-bet mRNA表达下降,Th2特异转录因子GATA-3mRNA表达升高,两者比值明显下降,说明原发性肝癌患者存在Th1/Th2平衡失调,其抗肿瘤免疫应答受限制,可能是其肿瘤免疫逃逸的机制之一。3、原发性肝癌患者外周血中Th17特异性转录因子RORgammat mRNA升高,提示肝癌患者外周血存在Th17优势化现象。
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