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[背景]骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes,MDS）常有多个基因突变,且基因突变影响患者生存预后。SF3B1突变的MDS患者骨髓环状铁粒幼红细胞（ringsideroblasts,RS）比例增高,总体生存预后较好。WHO（2016）诊断标准建议SF3B1突变但不伴有原始细胞增多（<5%）的MDS患者仅需骨髓RS≥5%即可诊断为伴环状铁粒幼红细胞增多的骨髓增生异常综合征（MDS with ring sideroblasts,MDS-RS）。[目的]研究MDS-RS患者的基因突变特征及其临床意义。[方法]收集2001年1月至2019年6月于我中心新诊断的255例原发性MDS-RS患者资料。129例采用一代测序、126例采用包含114个血液肿瘤相关基因的靶向二代测序（next generation sequence,NGS）进行基因突变分析。[结果]共193例（75.7%）检出SF3B1突变,其中SF3B1 K700E突变147例（76.2%）,5%≤RS<15%和RS≥15%患者各类型SF3B1突变检出率无显著差异（P值均>0.05）。非SF3B1基因突变较常见的有TET2（16.7%）、ASXL1（14.39％）、U2AF1（11.1%）、TP53（7.9%）、SETBP1（6.3%）和 RUNX1（6.3%）。5%≤RS<15%患者SETBP1突变率显著高于RS≥15%患者（21.4%对4.5%,P=0.044）,其余基因突变率无显著差异（P值均>0.05）。5%≤RS<15%患者SF3B1突变负荷与骨髓RS 比例呈正相关但无统计学意义（P=0.078,r=0.486）,而RS≥15%组中SF3B1突变患者骨髓RS 比例显著高于野生型患者[40.0%（15.0-80.0%）对 25.5%（15.0～82.0%）,P<0.001],且SF3B1突变负荷与骨髓RS比例呈正相关（P=0.009,r=0.261）。全部患者及RS≥15%患者中SF3B1突变型与野生型患者年龄、中性粒细胞计数（absolute neutrophil count,ANC）、血小板（platelet,PLT）、平均红细胞体积（mean corpuscular volume,MCV）、RS 比例、IPSS-R 染色体核型及IPSS-R 预后分组等方面差异显著（P值均<0.05）,而5%≤RS<15%和RS≥15%患者主要临床和实验室特征无显著差异。5%≤RS<15%和RS≥15%患者总体生存（overall survival,OS）时间无显著差异（P=0.314）。单因素及纳入年龄、IPSS-R染色体核型等临床参数的多因素分析表明,SF3B1突变是影响OS时间的独立良好预后因素（HR=0.265,95%CI0.077～0.917,P=0.036）,TP53突变是独立不良预后因素（HR=6.272,95%CI1.725～22.809,P=0.005）。根据SF3B1和TP53突变状态,MDS-RS患者分为四组:SF3B1和TP53均突变组、SF3B1和TP53均野生组、SF3B1野生伴TP53突变组及SF3B1突变伴TP53野生组,四组患者OS时间差异显著（P<0.001）。组间两两比较显示前三组患者间OS时间无显著差异,但SF3B1突变伴TP53野生组OS时间显著长于SF3B1野生伴TP53突变组、SF3B1和TP53野生组,而与SF3B1和TP53均突变组比较无显著差异。[结论]SF3B1突变在MDS-RS中的发生率较高,几乎均是错义突变,以K700E突变最为常见。5％≤RS＜15%和RS≥15%MDS-RS患者基因突变谱系、临床特征、生存预后大体相似。SF3B1突变是MDS-RS患者生存的独立良好预后因素,TP53突变是独立不良预后因素,二者联合可更精细地指导MDS-RS患者预后分层。[背景]原发性骨髓纤维化（primary myelofibrosis,PMF）和骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome,MDS）患者伴骨髓纤维化（MDS with myelofibrosis,MDS-MF）发病机制尚不清楚,可能与炎症反应、巨核细胞、骨髓基质细胞功能改变及基因突变有关。PMF患者骨髓中分泌纤维蛋白的成纤维细胞（fibrocytes）增生,并分泌表达多种促炎细胞因子。PMF小鼠模型研究结果表明骨髓Gli1+或LeptinR+间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）分化为肌纤维母细胞（myofibroblasts）促进MF进展。但成纤维细胞和肌纤维母细胞如何影响PMF和MDS患者骨髓纤维化及影响方式是否有差异尚未报道。[目的]比较PMF和MDS伴骨髓纤维化患者肌纤维母细胞和成纤维细胞来源的异同。[方法]①利用特异性免疫荧光抗体在PMF和MDS患者骨髓病理切片中标记Gli1、LeptinR、α-SMA、CD45 和 ProcollagenI,共聚焦显微镜成像后利用 Fiji-ImageJ软件定量分析 Glil+、LeptinR+、α-SMA、α-SMA/Gli1+、α-SMA/LeptinR+、α-SMA/Gli1+or LeptinR+和 ProcollagenI+/CD45+细胞计数。②靶向二代测序检测患者基因突变;③分析 α-SMA、α-SMA/Gli1+、α-SMA/LeptinR+、α-SMA/Gli1+or LeptinR+和ProcollagenI+/CD45+等纤维化相关细胞计数与MF分级及其他临床和实验室特征的关系;④纳入本研究的30例PMF和30例MDS患者作发现集,我中心210例PMF患者和884例MDS患者作验证集。在发现集中研究PMF和MDS患者基因突变与纤维化相关细胞计数（α-SMA、α-SMA/Gli1+、α-SMA/LeptinR+、α-SMA/Gli1+or LeptinR+和 ProcollagenI+/CD45+等细胞）、MF 分级的关系,并在验证集中加以验证,同时比较PMF和MDS患者纤维化相关基因的异同。[结果]①PMF患者脾大比例及外周血白细胞（white blood cell,WBC）、血红蛋白（hemoglobin,HGB）、血小板（platelets,PLT）水平及较MDS患者显著增高,但平均红细胞体积（meancorpuscularvolume,MCV）和骨髓原始细胞比例明显低于MDS患者（P值均<0.05）。MDS患者细胞遗传学异常比例约2倍于PMF患者（P=0.006）。MDS患者中位生存时间为20（1～26）个月,显著短于PMF患者（未达到,P=0.016）。②60例患者均行114个血液肿瘤相关基因靶向二代测序检测,共检出111个突变,JAK2和CALR突变多见于PMF患者,而MDS患者TP53突变较多见。③MF-2/3级PMF患者Gli1+、LeptinR+和α-SMA细胞计数显著高于MF-0/1级患者。与MF-0/1级MDS患者相比,MF-2/3级MDS患者仅LeptinR+和α-SMA细胞计数明显增高,Gli1+细胞计数相比较无明显差异。亚组分析显示,MF-2/3 级 PMF 患者 α-SMA/Gli 1+、α-SMA/LeptinR+和α-SMA/Gli 1+or LeptinR+细胞计数显著高于MF-0/1级PMF患者。与MF-0/1级MDS患者相比,MF-2/3 级 MDS 患者 α-SMA/Gli1+和 α-SMA/Gli1+or LeptinR+细胞计数显著增高,而α-SMA/LeptinR+细胞计数相比较无显著差异。④MF-2/3级PMF患者ProcollagenI+/CD45+成纤维细胞计数显著高于MF-0/1级PMF患者。在MDS患者中,MF-2/3级患者成纤维细胞计数较MF-0/1级患者显著增高。⑤比较 PMF 和 MDS 患者 α-SMA、α-SMA/Gli1+、α-SMA/LeptinR+、α-SMA/Gli1+or LeptinR+和 ProcollagenI+/CD45+等纤维化相关细胞计数,仅ProcollagenI+/CD45+细胞计数差异有统计学意义。比较MF-0/1级PMF患者和MF-0/1级MDS患者纤维化相关细胞计数,差异均无统计学意义。MF-2/3级患者中,PMF患者ProcollagenI+/CD45+细胞计数显著高于MDS患者,其他纤维化相关细胞计数均无显著差异。⑥PMF患者纤维化相关细胞计数与外周血网织红细胞比例相关,MDS患者则与骨髓原始细胞比例、IPSS染色体核型分组及外周血网织红细胞比例相关。Logistic多因素分析显示α-SMA细胞计数是PMF和MDS患者MF分级的独立影响因素。⑦在PMF发现集而非MDS发现集中,PMF基因集突变的患者α-SMA细胞计数显著高于野生型患者。在MDS发现集而非PMF发现集中,MDS基因集突变的患者α-SMA细胞计数较野生型患者显著增高。⑧在PMF验证集中,PMF基因集突变的患者中MF-2/3级患者比例更高,而在MDS验证集中PMF基因集突变与MDS患者MF分级无关。在MDS验证集中,MDS基因集突变的患者中MF-2/3级患者比例更高,而在PMF验证集中MDS基因集突变与PMF患者MF分级无关。[结论]PMF和MDS患者骨髓纤维化发生机制不同。细胞水平上,虽然PMF和MDS患者MF分级均与骨髓α-SMA细胞计数相关,但PMF和MDS伴骨髓纤维化患者骨髓中有不同的纤维化相关细胞亚群扩增。分子水平上,PMF和MDS患者MF分级与基因突变相关,且PMF纤维化相关基因与MDS纤维化相关基因有差异。