【摘 要】
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目的:腹泻型肠易激综合征（irritable bowel syndrome with diarrhea,IBS-D）的发病机制目前还未明确,近年来肠道菌群在IBS发病中的作用受到广泛关注。肠道菌群因为部位的不同可以划分为黏膜菌和腔内菌,以往认为黏膜菌通过肠上皮细胞和免疫细胞影响肠道屏障和免疫功能,而腔内菌主要在碳水化合物的消化和吸收中起作用。由于肠道菌群在疾病中的作用依赖于它们的功能,而这这两种肠
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目的:腹泻型肠易激综合征（irritable bowel syndrome with diarrhea,IBS-D）的发病机制目前还未明确,近年来肠道菌群在IBS发病中的作用受到广泛关注。肠道菌群因为部位的不同可以划分为黏膜菌和腔内菌,以往认为黏膜菌通过肠上皮细胞和免疫细胞影响肠道屏障和免疫功能,而腔内菌主要在碳水化合物的消化和吸收中起作用。由于肠道菌群在疾病中的作用依赖于它们的功能,而这这两种肠道菌群组成及其功能在IBS-D患者临床症状中扮演了什么样的角色目前还不清楚,本研究主要探讨黏膜菌和腔内菌菌群组成及功能与IBS-D患者临床症状的关系及可能的作用机制,为临床提供新的思路。方法:（1）69名符合罗马Ⅲ标准的IBS-D患者和20名健康志愿者收集临床资料,未进行肠道准备下通过直肠镜检查取6块黏膜组织为黏膜菌标本,同时取同一天的粪便为腔内菌标本;应用16s RNA焦磷酸测序分析黏膜菌和腔内菌菌群组成,及其与IBS-D临床症状的相关性。（2）在第一部分基础上应用PICRUSt来预测和分类菌群的基因功能,分析黏膜菌和腔内菌菌群功能与IBS-D临床症状的相关性,以及黏膜菌中与临床症状相关的优势菌属和功能基因之间的联系。（3）77名IBS-D患者先进行葡萄糖呼气氢试验检测SIBO,未行肠道准备条件下收集十二指肠黏液、十二指肠黏膜、直肠黏膜和粪便;应用16s RNA焦磷酸测序,分析SIBO+和SIBO-IBS-D患者的菌群组成和功能。结果（1）在所有受试者中黏膜菌和腔内菌之间存在显著差异;IBS-D患者黏膜菌相比腔内菌有更大的改变;黏膜菌与IBS-D临床症状相关,而腔内菌的整体组成变化不明显且与临床症状无关。IBS-D患者黏膜菌中4种优势菌属与腹痛和腹胀相关:毛螺菌属和柯林斯氏菌属的比例减少且与腹胀负相关,乳球菌属和鞘脂菌属的比例增加且与腹胀和腹痛呈正相关;这4种优势菌属在黏膜菌中发生了显著变化,而在腔内菌中没有变化。（2）本部分的结果发现同菌群结果相似,受试者的黏膜菌和腔内菌预测功能基因之间存在显著差异,并且IBS-D患者黏膜菌相比腔内菌预测功能基因有更多的变化,黏膜菌的预测功能基因与IBS-D临床症状相关,腔内菌的预测功能基因与临床症状无关。同时有黏膜菌中5个代谢相关的预测功能基因与临床症状腹痛腹胀密切相关。第一部分发现的与临床症状相关的4种优势菌属和本部分发现的这5个代谢相关的预测功能基因在黏膜菌中均发生了显著变化,而在腔内菌中没有变化。（3）SIBO+和SIBO-IBS-D在十二指肠和直肠黏膜菌的微生物多样性和组成有明显差异,但在十二指肠黏液和粪便中差异不大。直肠黏膜菌群中,需氧菌和革兰氏阴性菌明显减少,兼性厌氧菌和革兰氏阳性菌明显增多,SIBO+IBS-D的微生物代谢功能发生改变。SIBO+IBS-D患者直肠黏膜菌相关MDI显著升高,其诊断SIBO的临界值为-0.37,敏感性为56.55%,特异性为90.91%。结论:IBS-D患者的黏膜菌相较于腔内菌具有更显著的菌群失调,黏膜菌群组成和功能均与IBS-D临床症状密切相关,还可以做为预测SIBO的潜在指标。这提示我们要更加重视黏膜菌群在IBS-D疾病发生发展中的作用。
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