改进的侧流免疫层析法在检测心肌梗死早期标志物中的应用研究

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每年,数百万患者由于胸痛或其他表明急性冠脉综合征的症状而去急诊室就诊,然而,仅仅10%-15%最终被证实患有急性心肌梗死。诊断急性心肌梗死的过程不仅耗时而且昂贵,经常出现误诊或漏诊。因此,快速而精确的诊断或排查急性心肌梗死的意义重大。床边诊断法通过减少样品转运和预处理过程,而有可能实现早期快速诊断心肌梗死的目的。免疫层析试纸条是二十世纪五十年代初发展起来的一种新型快速的免疫分析技术。由于实验过程中不需进行标记物的结合与自由标记物的分离,省去了复杂的标本预处理过程;具有较好的敏感性、特异性和稳定性;与其他检验方法相比,操作简单,操作人员不用培训,且无需或仅需简单的小型仪器,可以在床边或采样现场即刻进行,因此,它以便捷、快速、准确和无污染等特点被广泛应用于医学诊断和治疗监测、司法科学、环境监测和食品安全等领域中生物标志物的识别和检测,但目前由于灵敏度和特异度等问题而使其在心肌梗死诊断中的应用受限。在过去几十年中,纳米金粒子由于特殊的理化性质在许多领域(特别是生物医学领域)受到了广泛的研究和运用。迄今,在生物医学中,纳米金已经广泛运用在基因组学、生物传感器、免疫分析、临床化学、肿瘤细胞的光热作用、药物和蛋白质的靶向传递、基于纳米光子探测系统的细胞和组织的光学成像等领域。为了实现心肌梗死相关高敏蛋白的快速半定量检测,本工作利用双纳米金粒子增强信号的方式构建了两种新型、快速而高敏的免疫层析试纸条方法:高敏C反应蛋白免疫层析试纸条和高敏肌钙蛋白I和肌红蛋白同时检测免疫层析试纸条,并以临床样品进行验证。在这两种方法的构建中,主要利用不同粒径的双纳米金粒子通过生物素-链霉亲和素体系联系起来,达到信号放大的目的。尽管本工作的主旨是设计并构建用于心肌梗死检测的快速而高敏的免疫层析试纸条,但是,我的研究是从纳米金粒子的合成和表征研究开始,这一纳米粒子在我课题的研究中占有举足轻重的作用,是我后续免疫层析试纸条研究的基石。论文分为以下七章节:第一章,前言,概述急性心肌梗死及与急性心肌梗死阳关生物标志物;纳米金粒子的合成、理化性质和应用,特别是在生物传感器中的应用:免疫层析试纸条法在生物医学中的应用。第二章,描述纳米金粒子制备和表征的方法研究。第三章,描述设计和建构双纳米金免疫层析试纸条用于检测C反应蛋白的研究。第四章,描述设计和建构双纳米金免疫层析试纸条用于同时检测肌钙蛋白I和肌红蛋白的研究。第五章,描述双纳米金免疫层析试纸条用于同时检测肌钙蛋白I和肌红蛋白的临床应用。第六章,总结论文的内容,并展望进一步的研究工作。第七章,为综述,分为两个部分,第一部分,纳米金粒子的合成、理化性质和应用,特别是在生物医学领域中的运用;第二部分,免疫层析试纸条在生物医学领域中的运用。附录中,列出了在完成本论文过程中发表和待发表的论文以及申请的专利,并向鼓励、指导或者支持我完成博士学位的所有人的致谢。
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