转染Survinvin基因的MSCs对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响

来源 :重庆医科大学 重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sohdengmang
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目的:探讨转染survinvin基因后的骨髓间充质干细胞(MSCs)在肾脏缺血微环境中的存活能力以及对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的修复作用能力和机制。方法:复苏、扩增培养已完成空病毒、Survinvin基因转染、鉴定、EGFP标记工作的MSCs,扩增培养,观察绿色荧光表达情况备用,48只SPF级健康雄性C57BL/6J分为正常对照组12只、IR组(小鼠双侧肾动脉夹闭40min后恢复血供)12只、空病毒转染移植组(MSCs组,小鼠双侧肾动脉夹闭40min后恢复血供24后经尾静脉注射200微升1×106个细胞)12只、survinvin基因转染移植组(SVV/MSCs组,小鼠双侧肾动脉夹闭40min后恢复血供24小时后经尾静脉注射200微升1×106个survinvin基因转染细胞)24只,选取细胞移植后1d、3d、7d、14d不同时间点采集血清行肌酐尿素氮检测,切取小鼠肾脏行石蜡切片观察MSCs存活数目并定量分析,HE染色观察肾组织病理变化及肾小管损害程度评分,ELISA检测肾脏匀浆中细胞因子HGF、bFGF、IL-10的表达情况。结果:复苏、扩增培养出的MSCs增值活力旺盛,荧光状态良好;移植细胞1天后MSCs组与SVV/MSCs组肌酐尿素氮水平明显低于IR对照组(p<0.01或p<0.05)。肾脏HE染色病理损害评分,干细胞移植组损伤较轻,SVV/MSCs明显低于其他两组(p<0.01或p<0.05)。第3天、14天存活于肾组织的移植细胞数目SVV/MSCs组远高于MSCs组,表达EGFP的MSCs主要分布于肾小球周围、小血管内壁、肾小管与肾小管之间的间质,而肾小管内壁几乎见不到表达EGFP的MSCs。在肾脏缺血损伤后保护性因子HGF、bFGF、IL-10水平升高SVV/MSCs也比IR组、MSCs组明显的多(P<0.01或p<0.05),并且在第14天时与正常对照组已无统计学差异。结论:转染Survinivin基因可以增加MSCs在缺血肾脏中的生存能力,MSCs主要通过其强大的旁分泌作用进一步促进肾脏损伤的修复。
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