最近几年,植物作为生物反应器已经出现了让人欣喜的研究成果,并且取得了显著进步。低生产消耗、高产品安全性、容易收集等优点,为植物反应器的快速发展提供了强大的驱动力。如今,利用植物反应器已经生产了各种各样的产品,如疫苗抗原,医用诊疗蛋白、工业蛋白、营养补充品(抗物质、维生素、碳水化合物和生物聚合物)等。20年来,糖尿病以10倍的增长率扩张,糖尿病也成了影响人类健康的重大疾病之一。糖尿病和其并发症严重影响了人的身心健康,给患者自己,家庭和社会带来相当大的经济负担。临床上,胰岛素被用来治疗Ⅰ型糖尿病和Ⅱ型糖尿病,它不仅可以降低血糖,还可以影响糖的代谢,糖原异生,糖原合成,减少糖原分解,加快葡萄糖的有氧氧化和无氧酵解。伴随着糖尿病患者数量的快速增加,胰岛素的需求量将会快速上升。我们实验室根据植物密码子的偏好性改造了人胰岛素原的基因序列,改变了胰岛素原的几个氨基酸,使胰岛素原变为长效胰岛素原和速效胰岛素原。改造后的胰岛素原序列和原始胰岛素原序列的末端添加了Flag标签,方便后续蛋白的检测和纯化。将郑玲博士构建的pCAMBIA2301-pRUBP-proinsulin和pCAMBI A2301-RD29A-Cre双菌共转化的方法侵染烟草。该植物表达载体的特点是以pCAMBIA2301为骨架,在多克隆位点插入拟南芥的pRUBP强启动子和胰岛素原基因,在抗性基因NptⅡ加入了Cre重组酶的识别位点loxp序列,构建成pCAMBIA2301-pRUBP-proinsulin植物表达载体；拟南芥诱导型启动子序列RD29A和Cre重组酶插入到植物表达载体pCAMBIA2301,构建了pCAMBI A2301-RD29A-Cre植物表达载体。利用含有Cre的表达载体和pCAMBIA2301-pRUBP-proinsulin植物表达载体,双菌共转化的方法获取表达双载体的阳性烟草植株。经过PCR检测,GUS报告基因分析获得转基因烟草4株。利用pCAMBIA3301植物表达载体骨架,构建成3种pCAMBIA3301-35S-proinsulin植物表达载体,转化烟草和玉米。通过RT-PCR检测,3种表达载体均已成功转入烟草中,并且能够在转基因烟草中表达。利用农杆菌和基因枪介导法对玉米进行遗传转化,转基因玉米的经过PCR和RT-PCR检测阳性转基因苗。