【摘 要】
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真核细胞被细胞内膜分隔成许多不同的区室,各区室之间通过复杂的囊泡运输和微管系统进行物质交换和信息传递。囊泡运输具有高度的选择性,Rab-G7Pase作为囊泡运输的分子开关,在囊泡运输的不同阶段调节囊泡特定的运输途径。纤毛虫是一类低等的单细胞真核生物,它的许多功能由细胞内特化的细胞器来完成,各细胞器之间通过囊泡转运进行物质交换。研究Rab蛋白在其中的功能,有助于了解真核细胞中囊泡定向运输机理。
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真核细胞被细胞内膜分隔成许多不同的区室,各区室之间通过复杂的囊泡运输和微管系统进行物质交换和信息传递。囊泡运输具有高度的选择性,Rab-G7Pase作为囊泡运输的分子开关,在囊泡运输的不同阶段调节囊泡特定的运输途径。纤毛虫是一类低等的单细胞真核生物,它的许多功能由细胞内特化的细胞器来完成,各细胞器之间通过囊泡转运进行物质交换。研究Rab蛋白在其中的功能,有助于了解真核细胞中囊泡定向运输机理。 本研究以八肋游仆虫（Euplotes octocarinatus）为材料,从其大核DNA中克隆得到16种Rab新基因,这些基因全长为767 bp,两端为端粒序列,开放读框为624 bp,编码207个氨基酸,Eorab基因序列中包含2～3个通用终止密码子TGA,在此编码半胱氨酸。这些基因拟编码的蛋白属于Rab蛋白家族,具有Rab家族保守的结构特征,命名为Eorab1b～Eorab1u,16种Rab基因同源性高达87.6～99.5%。 从游仆虫小核DNA中克隆得到了1种Rab新基因,该基因全长为784 bp,编码框亦为624 bp,命名为miEorab基因。 对来自大核和小核DNA的rab基因进行比较,发现miEorab基因中包含2个IESs（Internal Eliminated Sequences）序列,2个IESs的删除机制存在明显差异。 将Eorab1f中2个TGA突变为TGC。突变后的Eorab1f构建于原核表达载体pRSETc中。pRSETc-Eorab1f转化E.coli BL21（DE3）,经IPTG诱导、SDS-PAGE分析及Western blotting鉴定,目的蛋白获得表达。 表达产物经IMAC金属螯合亲和层析及Resource-Q阴离子交换层析纯化,获得电泳纯的蛋白。Brandford法检测表明纯化的目的蛋白产量为1.353 mg/L。Western blotting分析表明该蛋白为融合有6个
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随机扩增多态DNA技术（简称RAPD）是二十世纪90年代发展起来的一项DNA分子多态检测技术,它建立在PCR技术基础上,以一系列不同随机排列的碱基序列—单链寡核苷酸为引物—对所研究的基因组DNA进行PCR扩增。该技术能够在没有任何遗传背景的情况下,对物种基因组进行DNA多态性分析。它不但能通过众多的引物检测大量的基因位点,且具有高效、快速、样品用量少和对材料要求不高等优点,目前已广泛应用于动植物的
设N为有限群G的正规子群,θ为N的G-不变的不可约复特征标。借助射影表示以及上同调理论等技术,对每个特征标三元组（G,N,θ）均定义了一个上同调元素ω（θ）∈H2（G/N,C*）以描述θ的可扩张性障碍,即θ可扩张为G的特征标当且仅当ω（θ）=1。 本文重点探讨了障碍映射ω:IrrG（N）→H2（G/N,C*）的若干乘法性质,我们证明了只要θθ′∈IrrG（N）,就有ω（θθ′）=ω（θ）ω（
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