p38 MAPK对烧伤大鼠微血管内皮细胞连接及骨架重组的调控作用

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目的(Objective):微血管通透性增高是创伤、烧伤、休克和炎症等许多病理过程中的重要变化,特别在烧伤性休克中对病情的发生、发展和转归具有重要的影响。通过计算机相关分析软件的应用,探讨烧伤对微血管内皮细胞肌动蛋白骨架和紧密连接重构、通透性增高的影响以及p38 MAPK在烧伤微血管通透性升高中的作用与机理,进一步阐明烧伤液体丢失的分子机制,探索新的治疗方法以及发现新的药物,为临床工作中烧伤液体丢失的防治提供新靶点。 方法(Methods): 利用游离微血管技术,游离出正常和烧伤大鼠的皮肤微静脉,分别作为实验研究的正常对照组和烧伤实验组。 利用游离微静脉模型,标记与ZO-1单克隆抗体耦合的荧光标记蛋白以及F-actin荧光探针,通过激光扫描共聚焦显微镜观察正常大鼠皮肤微静脉和烧伤大鼠皮肤微静脉紧密连接蛋白和骨架蛋白的分布及结构,经过计算机图像和荧光比率测定法,定量观察正常大鼠皮肤微静脉的基础通透性,并与骨架蛋白、紧密连接蛋白等进行对比,探讨其相关性。 利用烧伤大鼠游离微静脉模型,以p38 MAPK的特异性抑制剂SB2035080孵育,然后标记与ZO-1单克隆抗体耦合的荧光标记蛋白以及F-actin荧光探针,通过激光扫描共聚焦显微镜观察SB2035080对烧伤后微静脉内皮紧密连接蛋白
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